• 首页
  • 装备资讯
  • 热点专题
  • 人物访谈
  • 政府采购
  • 产品库
  • 求购库
  • 企业库
  • 院校库
  • 案例·技术
  • 会展信息
  • 行业日历
  • 液相色谱技术在食品及农产品残留检验中的应用

    中国教育装备采购网2010-07-23 15:39围观168次我要分享我要投稿

        摘要

        目的:建立高效液相色谱法测定血清中丙戊酸浓度方法血清用正己烷提取,经α-溴苯乙酮衍生后浓缩进样。结果:丙戊酸的线性范围1.76~176.0μg/ml。平均回收率于97%。日内及日间RSD小于5%。结论:本法快速、简便、准确。可应用于临床丙戊酸血药浓度测定。

        关键词 高效液相色谱法;丙戊酸;柱衍生法

        丙戊酸(Valproic acid)在临床常用于抗癫痫治疗,由于体差异较大。血药浓度过高对肝脏有损害。因此,有必要对体内血药浓度进行监测。由于丙戊酸在紫外区无特征吸收,故本法采用柱前衍生化,用α-溴苯乙酮将丙戊酸衍生化。生成苯甲酰甲基丙戊酸,在紫外区有特征吸收,用高效液相色谱法测定。本法已用于临床血药浓度测定。

        1 实验方法

        1.1 药品与试剂丙戊酸钠对照品(来源:中国药品生物制品检定所;含量:99.8%);正庚酸;a-溴苯乙酮;正己烷;硫酸;三乙胺,异丙醇;甲醇及乙腈为色谱纯;重蒸馏水。

         1.2 仪器与色谱条件美国Beckman公司HPLC仪(125双泵,166检测器),分析柱为Ultrasphere-0DS(250mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-水(50:25:25),检测波长为243nm,柱温为常温。

        1.3 标准溶液的配制精密称取5.28mg丙戊酸钠对照品于l0ml容量瓶中。加水溶解并稀释至刻度,得标准溶液0.528 mg/ml。

        1.4 相关溶液的配制 内标液:取1ml正庚酸至100ml容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,得1%正庚酸内标液。衍生化试剂:精密称取1.0 g a-溴苯乙酮至100ml容量瓶中,用乙腈稀释至刻度。

        1.5 样品处理取血清0.1ml,加内标液10μl,异丙醇50μl,1mol/L硫酸0.1ml混匀,加正己烷2ml,涡旋提取3min,2500r/min离心,10min后取上清液1ml,加a-溴苯乙酮液10μl,三乙胺10μl,混匀,于50℃水浴反应10min后,在65℃水浴中用氮气吹干,残渣加甲醇200μl溶解进样20μl,以内标法峰面积定量。

        2 结果

        2.1 色谱行为按样品处理方法分别提取空白血清,空白血清加对照品,测得色谱图。

        2.2 线性关系 取对照品液适量加入0.1ml血清,使对照品浓度为1.76,17.6,35.2,70.4,88.0,140.8,176.0μg/ml,各加内标液10μl,按样品处理方法操作。得浓度C与峰面积A回归方程:C=63.90620A1.31331,r=0.9999,(n=3)。其中A为A样品/A内标,线性范围1.76-176.0μg/ml。

        2.3 回收率实验配制对照品液为高、中、低3浓度的血清样品各5份,参照样品处理方法操作,计算回收率。

        2.4 精密度实验配制对照品液高、中、低3种浓度的血清样品各5份,分别于同一天及5d内每天测定。

        3 讨论   

        有文献报道,采用正戊烷提取血样,本实验先采用正戊烷提取,由于衍生化反应温度为50℃,而正戊烷沸点为36.1℃ ,未衍生化完全溶剂已蒸干,故采用正己烷(沸点69℃)提取。

    来源:Web我要投稿
    采购网二维码

    扫一扫,欢迎关注

    教育装备采购网官方微信

    掌握教育装备行业最新、最权威资讯

    相关阅读

  • 液相色谱仪应该要注意哪些方面的维护
    中国教育装备采购网2017-09-07 11:12:28
  • 环保部发6项环保标准 涉液相色谱等仪器
    中国仪器仪表网2017-09-07 10:06:06
  • 分析仪器仪表遇到故障的处理办法
    中国教育装备采购网2017-08-24 13:37:41
  • 液相色谱系统的组成及保养知识
    中国教育装备采购网2017-07-19 14:53:36
  • 液相色谱仪常见故障的解决方案

    液相色谱仪常见故障的解决方案
    仪表网2017-07-14 17:13:52
  • 液相色谱技术跨界应用市场大 企业迎机遇

    液相色谱技术跨界应用市场大 企业迎机遇
    中国化工仪器网2016-12-30 09:34:06