中药制剂中大黄素和大黄酸的分离液相色谱法

中国教育装备采购网2012-09-26 16:30围观1637次我要分享

  1仪器和试剂

  LC-10T高效相色谱仪,VI2010S色谱数据处理软件。甲醇(色谱纯),水为重蒸馏水,其它试剂为分析纯。大黄酸对照品(供含量测定用,批号0757-9804)由中国药品生物制品检定所提供。样品常通口服液为南方医院药学部试制。

  2色谱条件

  VertexC18液相色谱柱(150×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液85:15,检测波长为254nm,流速为1ml·min-1。温度:室温20℃。在此条件下,大黄酸的保留时间约12min,与其它峰分开。大黄酸对照品、常通口服液的高效液相色谱图见图1、2。图1大黄酸标准品HPLC色谱图图2常通口服液HPLC色谱图

  3线性关系考察

  精密称取大黄酸对照品0.00402g,置100ml量瓶中,加甲醇至刻度,制得对

  照品储备液,取储备液适量,加流动相制成1ml含201、4.02、8.04、12.06、20.10、40.20μg的对照品系列溶液,各依法进样20μl,按上述色谱条件进行测定。以大黄酸对照品浓度X为纵坐标,峰面积Y(μg)为横坐标,绘制标准曲线。线性回归方程为:Y=9.534×10-6X 0.1934,相关系数r=1.0000。说明进样量在0.0402-0.804μg范围内,对照品浓度与峰面积呈线性关系。

  3对照品溶液与供试品溶液的制备

  对照品溶液的制备:精密移取大黄酸对照品储备液适量,加流动相稀释为浓度为8.04μg/ml对照品溶液。

  供试品溶液的制备:精密移取常通口服液10ml,加入1ml0.8%的磷酸溶液,加入甲醇定容至20ml,摇匀,离心10min,取上清液用微孔滤膜(0.45μm)滤过,取续滤液,即为供试品溶液。

  空白溶液的制备:取除大黄的药味按同一工艺制成的缺大黄空白样品0.2ml,按供试品溶液制备方法操作,即得。

  4精密度实验

  精密吸取8.04μg/ml的对照品溶液10μl,注入高效液相色谱仪,连续测定5次,大黄酸的平均峰面积为831543,RSD=0.18%(n=5)。表明结果精密度良好。

  5稳定性试验

  精密吸取室温保存的同一对照品溶液10μl,同法每间隔一定时间进样测定,共5次,结果表明供试品溶液在7天内无明显变化,表明此对照品基本稳定,RSD=0.49%.

  6重复性试验

  取同一批常通口服液6份各10ml,依法测定,结果大黄酸含量的平均值为165.62,RSD=2.15%(n=6)。说明方法重复性较好.

  文章链接:中国化工仪器网 http://www.chem17.com/news/detail/35569.html

来源:中国化工仪器网

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