ELISA放大系统_中国教育装备采购网
  • 首页
  • 装备资讯
  • 热点专题
  • 人物访谈
  • 政府采购
  • 产品库
  • 求购库
  • 企业库
  • 院校库
  • 案例·技术
  • 会展信息
  • 行业日历
  • ELISA放大系统

    中国教育装备采购网 2012/11/9 11:02:03 围观79次 我要分享

    ELISA放大系统 为了提高ELISA的敏感性,在ELISA中人们采用不同的放大机制,建立在ELISA的几类放大系统.现在向读者介绍几个比较重要的ELISA放大系统. 一,生物-亲和素系统(Biotin-Avidin System,简称BAS) 生物素与抗生物素之间具有极强的亲和力,可以缩短反应时间,达到快速检测的目的.另外,抗体和酶的生物素标记率高,又不影响其活性,每个亲和素分子能结合4个生物素,每个生物素能标记大量酶分子,使得ELISA的敏感性大大提高,生物素与亲和素的结合也极为稳定,不会在洗涤过程中脱落.BA-ELISA是在常规ELISA的基础上,结全生物素(Biotin)与亲和素(Avidin)的高度放大作用,形成的一种检测方法.BA-ELISA分为:  1,LAB法即酶联亲和素-生物素标记法(Labeled avidin-biotin,简称LAB).用辣根过氧化物酶直接标记亲和素,用生物素标记第二抗体.   2,ABC法即酶联亲和素-生物素-过氧化物酶复合物法(Avidin-Biotin-Peroxidase Complex,简称ABC).如用链霉亲和素(Streptavidin),则形成链霉亲和素-酶联生物素复合物(Streptavidin-Biotin-Peroxidaes Complex,简称SABC).在ABC法中,用生物素标记第二抗体,又用生物素标记过氧化物酶.在使用前30min,亲和素与酶联生物素以1:1的比例混匀.1个亲和素分子结合3个生物素分子,亲和素剩下的1个结合点与标记第二抗体的生物素结合,亲和素起桥联作用.ABC法比PAP(Peroxidase-antiperoxidase tech-nique)法敏感几十倍.   3,BAB法即酶联亲和素-生物素桥法(Bridged avidin-biotin,简称BAB).用游离亲和素(或链霉亲和素)作为桥联剂,将生物素标记后开成的复合物与酶标记生物素连结起来,然后进行样品的检测.由于标记抗体分子上连有多个生物素,因此,最终形成的抗原-生物素标记抗体-亲和素-酶标生物素复合物可积聚大量的酶分子;加入相应底物后,产生强烈的酶促反应,大幅度提高检测的灵敏度.   二,碱性磷酸酶放大系统   碱性磷酸酶广大系统包含多种放大机制:碱性磷酸酶不直接催化底物生成有色产物而是催化生成辅酶I(NAD+),辅酶I激活下一轮氧化还原反应,辅酶I启动的反应为底物的颜色化学转变提供条件.在供氢体的作用下,底物氧化/还原发生颜色变化.   三,微粒放大系统   每个适当的微粒表面可以同时结合(或吸附)大量的标记酶和抗体分子.在包含微粒放大系统的夹心ELISA法中,微粒通过结合于其上的第二抗体结合于第一抗体.同时微粒上又结合着标记酶,其数量大大多于第二抗体能结合的标记酶,从而得以放大.   四,催化的显示剂沉积   催化的显示剂沉积(Catalyzed reporter deposition,简称CARD).CARD依次使用三套显示剂:第一套显示剂是联在抗体上的HRP,它通过抗体与待测抗原的反应结合于固相表面;第二套显示剂是标有生物素的苯酚,它受到第一显示剂的氧化催化后沉积于固相表面;第三套显示剂是标在链霉亲和素(Streptavidin)上的AP,可被固相上的生物素捕获,放大效果非常大.

    相关下载

    点击进入上海研谨生物科技有限公司展台查看更多 我要投稿
    2018南京展
    采购网二维码

    扫一扫,欢迎关注

    教育装备采购网官方微信

    掌握教育装备行业最新、最权威资讯

    中达电通股份有限公司
    产品线 企业简称 成立时间