婴幼儿奶粉双氰胺检测- 默克色谱柱快速解决方案

中国教育装备采购网2013-02-07 09:28围观1759次我要分享

  ZIC®-HILIC色谱柱快速检测婴幼儿奶粉中双氰胺

  默克密理博应用实验室 2013-01-29

  1 前言

  2013 年1 月,新西兰牛奶及奶制品被检测出含有低含量的有毒物质双氰胺(二氰二氨Dicyanodiamide,DCD),已经下令禁售含有DCD的奶制品。中国的进口奶粉八成来自新西兰,全球60%以上的奶源产自新西兰。新西兰奶农通常会在牧草上喷洒双氰胺,防止肥料中的副产品硝酸盐流入河流和湖泊。

  

 

  双氰胺

  目前,还没有相应的食品含量标准和检测标准。默克密理博致力于分析方法的开发,为客户提供简便、快速的解决方案。双氰胺极性较强,易溶于水,中性及酸性条件下易电离,适合使用默克密理博的两性离子型亲水作用(ZIC®-HILIC)色谱柱分离。同时,双氰胺在218nm下有强紫外吸收,可以采用ZIC®- HILIC 色谱柱在HPLC-UV条件进行快速分析,亦可在LC-MS/MS进行痕量检测。

  2 仪器及试剂

  2.1 仪器设备

  2.1.1 色谱柱:ZIC®-HILIC, PEEK HPLC Column 250 x 4.6 mm, 5 μm, 200 Å(1.50458.0001)

  2.1.2 HPLC:Agilent 1260HPLC(DAD检测器)

  2.1.3 单道移液器Transferpette®S,Digital adjustable 500-5000ul(Brand:BR704782)

  2.1.4微孔滤膜:0.45um,PTFE(Millipore:SLFHX13NL)

  2.1.5纯水系统:Milli-Q3(Millipore)

  2.1 仪器设备

  2.1.1 色谱柱:ZIC®-HILIC, PEEK HPLC Column 250 x 4.6 mm, 5 μm, 200 Å(1.50458.0001)

  2.1.2 HPLC:Agilent 1260HPLC(DAD检测器)

  2.1.3 单道移液器Transferpette®S,Digital adjustable 500-5000ul(Brand:BR704782)

  2.1.4微孔滤膜:0.45um,PTFE(Millipore:SLFHX13NL)

  2.1.5纯水系统:Milli-Q3(Millipore)

  2.2 试剂

  2.2.1色谱乙腈:LichroSolv®Acetonitrile Gradient Grade(1.00030.4008)

  2.2.2乙酸铵:Ammonium acetate for analysis EMSURE® ACS,Reag. Ph Eur(1.01116.1000)

  2.2.3甲酸:Formic acid 98-100% for analysis EMSURE® ACS,Reag. Ph Eur(1.00264.1000)

  2.2.4 2%甲酸溶液:取20ml甲酸,加入1000ml超纯水中

  2.2.5 70/30乙腈-甲酸溶液:去700ml乙腈(2.2.1),与300ml 甲酸溶液(2.2.4)混合

  3 实验方法

  3.1 样品处理

  方法1:

  取婴幼儿配方奶粉2g于50mL PP管中,加18mL 2%的甲酸水溶液,加盖密闭。摇振60秒,再超声30分钟,取出,再摇振60秒,放入离心机中离心(4000转),20分钟。取出,吸取上清液50ul,于10ml PP管中,加入950ul乙腈,加盖密闭,振摇60秒,吸取溶液,过滤,即得供试液。

  方法2:

  取婴幼儿配方奶粉2g于50mL PP管中,加20mL 乙腈-甲酸水溶液,加盖密闭。摇振60秒,再超声30分钟,取出,再摇振60秒,静置,吸取上层溶液,过滤,即得供试液。

  加标样品同法配制。

  3.2 测试条件

  3.2.1 色谱条件

  流动相 (v/v): A-醋酸铵溶液(10 mM),B-乙腈

  比例*:A:B=12:88

  流速:1 mL/min

  进样量:20ul

  3.3 测试结果

  按照方法1处理,结果如下:

  3.3.1 对照品图谱

  

 

  (DCD浓度1.25ug/ml)

  双氰胺保留时间4.98min,理论塔板数13086,拖尾因子1.2.

  3.3.2 无检出的奶粉空白

  

 

  3.3.3 奶粉加标

  

 

  测试液中加入的标样浓度:5ug/ml

  

 

  测试液中加入的标样浓度:0.05ug/ml.

  3.3.4 某知名品牌奶粉

  

 

  该品牌奶粉中未检出双氰胺.

  4 结论

  采用ZIC®-HILIC色谱柱,可用于双氰胺的快速检测。处理方法简单,色谱峰型良好,方法重现性良好(RSD<2%),检测浓度在 0.5-10ug/ml之间现行关系良好(R=0.999),加样回收率在95.6-101.5%之间。按照方法1的处理,LOD为1.3ug/g奶粉,按照方法二处理,LOD可达0.07ug/g。

  该色谱柱还能用于三聚氰胺、双氰胺、三聚氰酸、二甲双胍、尿素等的同时检测,如:

  

 

  另外,LC-MS/MS采用如下色谱条件:

  色谱柱:ZIC®-HILIC (5 µm, 200Å) PEEK 150x2.1 mm

  流动相:A: 95:5 ACN:0.1% formic acid/10 mM ammonium formate in H2O

  B: 50:50 ACN:0.1% formic acid/10 mM ammonium formate in H2O

来源:默克化工技术(上海)有限公司

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