• 首页
  • 装备资讯
  • 热点专题
  • 人物访谈
  • 政府采购
  • 产品库
  • 求购库
  • 企业库
  • 院校库
  • 案例·技术
  • 会展信息
  • 行业日历
  • 人γ干扰素(IFN-γ)酶联免疫分析

    中国教育装备采购网2014-01-07 10:06围观62次我要分享我要投稿

    人ELISA试剂盒使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中γ干扰素(IFN-γ)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人γ干扰素(IFN-γ)水平。用纯化的人γ干扰素(IFN-γ)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入γ干扰素(IFN-γ),再与 HRP 标记的γ干扰素(IFN-γ)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的γ干扰素(IFN-γ)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人γ干扰素(IFN-γ)浓度。试剂盒组成130 倍浓缩洗涤液20ml×1 瓶7终止液6ml×1 瓶2酶标试剂6ml×1 瓶8标准品(800ng/L)0.5ml×1 瓶3酶标包被板12 孔×8 条9标准品稀释液1.5ml×1 瓶4样品稀释液6ml×1 瓶10说明书1 份5显色剂 A 液6ml×1 瓶11封板膜2 张6显色剂 B 液6ml×1/瓶12密封袋1 个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。人ELISA试剂盒操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。400 ng/L5 号标准品150μl 的原倍标准品加入 150μl 标准品稀释液200 ng/L4 号标准品150μl 的 5 号标准品加入 150μl 标准品稀释液100 ng/L3 号标准品150μl 的 4 号标准品加入 150μl 标准品稀释液50 ng/L2 号标准品150μl 的 3 号标准品加入 150μl 标准品稀释液25 ng/L1 号标准品150μl 的 2 号标准品加入 150μl 标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl,待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl(样品最终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。4.配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。7.温育:操作同 3。8.洗涤:操作同 5。9.显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15 分钟.10. 终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD 值大于标准品孔第一孔的 OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。人ELISA试剂盒保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6 个月
    2018中国(北京)未来教育装备展示会
    采购网二维码

    扫一扫,欢迎关注

    教育装备采购网官方微信

    掌握教育装备行业最新、最权威资讯

    相关阅读

  • 混凝试验搅拌器的适用范围

    混凝试验搅拌器的适用范围
    中国教育装备采购网中国教育装备采购网
  • 非接触档案书刊扫描仪:纸质档案数字化流程

    非接触档案书刊扫描仪:纸质档案数字化流程
    中国教育装备采购网中国教育装备采购网
  • 缩微胶片档案数字化应用

    缩微胶片档案数字化应用
    中国教育装备采购网中国教育装备采购网
  • 不只健胃整肠!乳酸菌还能预防甲型流感病毒

    不只健胃整肠!乳酸菌还能预防甲型流感病毒
    中国教育装备采购网中国教育装备采购网
  • 小贴士:清洗定氮仪的步骤和方法
    中国教育装备采购网2017-12-15 13:54:35
  • 烟包镀铝纸对外界水蒸气阻隔性的监测方法

    烟包镀铝纸对外界水蒸气阻隔性的监测方法
    中国教育装备采购网中国教育装备采购网
  • 液氮冷冻治疗仪的使用方法和注意事项

    液氮冷冻治疗仪的使用方法和注意事项
    中国教育装备采购网中国教育装备采购网
  • 浅析电子显微镜涂层技术原理及应用
    浅析电子显微镜涂层技术原理及应用
    浅析电子显微镜涂层技术原理及应用
    浅析电子显微镜涂层技术原理及应用
    中国教育装备采购网2017-12-15 11:15:03