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  • 智能基因扩增仪使用时不需要每个循环加酶

    中国教育装备采购网2014-01-17 13:25围观92次我要分享我要投稿


            上海皓庄仪器有限公司皓庄(LNB)品牌基因扩增仪PCR仪之PCR技术阐述DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。
      但是,DNA聚合酶在高温时会失活,因此,每次循环都得加入新的DNA聚合酶,不仅操作烦琐,而且价格昂贵,制约了PCR技术的应用和发展。发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。
      上海皓庄仪器有限公司皓庄(LNB)品牌基因扩增仪PCR仪之PCR工作原理:

      类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时 聚合酶链式反应间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;③引物的延伸:DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程,就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。

          上海皓庄仪器有限公司是专业的实验室设备生产企业。公司集研发、生产、销售和服务为一体,专营各类恒温箱、全温振荡培养箱及水浴摇床等。产品广泛应用于医疗卫生、农业环保、卫生防疫、科研等单位,为微生物、病毒、细菌培养、发酵、杂交和生物化学反应及细胞组织等研究提供了有效地帮助。 

    来源:上海皓庄仪器有限公司作者:上海皓庄仪器有限公司我要投稿
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