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  • 中科大界面物理化学的非线性光谱研究再获新进展

    中国教育装备采购网2014-03-10 10:31围观329次我要分享我要投稿

      合肥微尺度物质科学国家实验室(筹)与化学物理系罗毅教授研究团队的叶树集副教授小组继2012年成功利用非线性和频光谱技术从分子水平上理解了生物膜上离子通道蛋白质通道开放与关闭机理后,在界面蛋白质分子结构表征方面再获重要进展。该小组在国际上首次成功测出界面蛋白质的酰胺III谱带信号,解决了如何区分界面蛋白质a-螺旋结构和无规卷曲结构这一界面表征难题,研究成果以题为“Accurate Determination of Interfacial Protein Secondary Structure by Combining Interfacial-Sensitive Amide I and Amide III Spectral Signals”发表于国际著名期刊上。

      如何精确表征蛋白质,特别是界面蛋白质的分子结构是理解蛋白质结构演变的关键,是国内外学者共同面临的一个非常重要难题。针对该难题,该小组发展了界面光谱多谱带协同表征方法,首次利用和频光谱技术成功测出了常规手段无法测量的界面蛋白质酰胺III信号。虽然a-螺旋与无规卷曲结构的酰胺I谱带振动峰都位于1650 cm-1左右,但在酰胺III谱带区域,它们的振动峰分别位于1260 cm-1以上和1260 cm-1以下(图1左),研究发现两种结构所对应的酰胺III谱带特征峰面积比与蛋白质中无规卷曲结构含量成线性关系(图1右)。将酰胺I和酰胺III信号结合起来,解决了如何区分界面蛋白质a-螺旋与无规卷曲结构这一界面蛋白质多年的难题。审稿人给与了该工作极高的评价,其中一审稿人认为该工作解决了一个蛋白质表征上的缺口,提供了新的光谱窗口“The authors are attempting to address a measurement gap in the structural characterization of proteins,…, this new spectral window may help address that cannot currently be tackled using existing alternative methods.”。另一审稿人说该工作是一个重要突破“The successful detection of low frequency SFG signals is an important breakthrough”。

      图1、界面蛋白质酰胺III谱带的和频光谱及其与蛋白质中无规卷曲结构含量关系

      此外,在手性分子理论以及非线性光谱理论的启发下,该研究组成功发展了免标记的手性与非手性界面光谱表征技术,原位、实时地表征了胆固醇分子在生物膜上的组装与运输行为:胆固醇分子以10°左右的倾斜取向角度插入中性生物膜中,并停留在生物膜磷脂双层膜的外层,在纯水环境下没有发生翻转行为(flip-flop),胆固醇浓度较低时,胆固醇主要以图2B中的c方式组装,但高浓度下则以b方式组装为主。该成果发表于J. Phys. Chem. Lett. 2014, 5, 419–424。该技术将为胆固醇在真实细胞环境下的组装与动力学行为研究提供了分子水平上的表征技术与研究思想指导。

      

      图2、A) 6-Ketocholestanol 分子结构; B) 6-Ketocholestanol 分子可能的组装方式

      叶树集副教授研究小组作为国际上利用非线性和频光谱技术研究界面蛋白质分子结构与动力学仅有的几个小组之一,发展了具有特色的表面与界面生物分子结构表征手段,并围绕生物界面相关物理化学问题及其新表征方法的发展开展系统研究,在JACS, Langmuir, J. Phys. Chem. C, Analyst等国际著名期刊上发表了多篇系统性文章,研究成果被多种高端杂志JACS, PNAS, Ann. Rev. Anal. Chem., 和 Chem. Rev.等介绍与引用,获得国内外同行的高度认可。发表于J. Am. Chem. Soc. 2012, 134, 6237?6243的工作入选了自然科学基金重大研究计划“可控自组装体系及其功能化”中期汇报的的重要进展之一。由于该小组系统而有特色的研究工作,2013年Elsevier出版社邀请该小组为著名丛书“Advances in Protein Chemistry and Structural Biology”撰写综述论文(Adv. Protein Chem. Struct. Biol. 2013, 93, 213-255.),成为该丛书(包括Advances in Protein Chemistry)1944年创刊以来,第五篇以国内为第一作者单位署名发表的文章。以上工作得到科技部、基金委、中央高校创新团队等资金资助。

    来源:中国科学技术大学我要投稿
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