脂类染色

中国教育装备采购网2014-10-20 09:30围观930次我要分享

  一、脂类概述

  脂类物质在人体中占有相当大的部分,通常它们在人体内以两种形式存在,第一种为脂肪,主要为中性脂肪,储存的部位如皮下,大网膜,肌间肾周围组织等部位,另外一种为结构脂肪,如磷脂,胆固醇等它们与蛋白,糖类结合在一起存在于细胞内,构成细胞的组成成分。

  1、单纯脂质:由脂肪酸各醇化合的酯,如中性脂肪,油及蜡等,苏丹染料可染为黑色或红色。

  2、复合物质,脂肪酸的酯经水解后生成醇类,脂肪酸,磷酸和含氮的碱基等,复合脂质分为磷脂和糖脂。

  ①磷脂:卵磷脂,脑磷脂和神经鞘磷脂。苏丹黑染色为阳性,PAS反应为阴性。

  ②糖脂,PAS反应呈阳性。

  ③衍生脂质:指尚具有脂质性质的单纯脂质或复合脂的水产物,属于这类的有脂肪酸和固醇类。

  脂肪酸:硫酸耐尔蓝阳性,PAS阴性。

  胆固醇及其酯:Schultz试验阳性。

  组织化学的脂类物质:

  1、中性物质,如甘油三酯,胆固醇及其酯,类固醇和某些糖酯。

  2、酸性脂质,脂肪酸,磷脂。

  二、苏丹III IV联合法(combined SudanIII IV method for lipids)

  1、脂类组织的固定及固定液

  脂类组织的固定特别要注意的问题,就是不要选择含酒精的固定液,因为酒精可把脂类物质溶解,因此,用于脂类物质的首选固定液是甲醛,它可较好地保存脂类物质。

  2、试剂的配制:苏丹III0.2g,70%酒精50ml;苏丹IV0.5g丙酮50ml。

  3、操作步骤:

  (1)用经过甲醛固定过的组织作冰冻切片,厚约10-15um,切完后放入蒸馏水中,染色前放入50%-70%酒精洗。

  (2)入苏丹III IV染液染5分钟,

  (3)70%酒精分化,

  (4)水洗,

  (5)苏木素浅染细胞核,

  (6)水洗,必要时分化,

  (7)蓝化,如为漂浮染色,此时应将切片附贴于载片,

  (8)甘油明胶封固。

  结果:脂类物质呈现橘红色或鲜红,核蓝色。

  一、脂类概述

  脂类物质在人体中占有相当大的部分,通常它们在人体内以两种形式存在,第一种为脂肪,主要为中性脂肪,储存的部位如皮下,大网膜,肌间肾周围组织等部位,另外一种为结构脂肪,如磷脂,胆固醇等它们与蛋白,糖类结合在一起存在于细胞内,构成细胞的组成成分。

  1、单纯脂质:由脂肪酸各醇化合的酯,如中性脂肪,油及蜡等,苏丹染料可染为黑色或红色。

  2、复合物质,脂肪酸的酯经水解后生成醇类,脂肪酸,磷酸和含氮的碱基等,复合脂质分为磷脂和糖脂。

  ①磷脂:卵磷脂,脑磷脂和神经鞘磷脂。苏丹黑染色为阳性,PAS反应为阴性。

  ②糖脂,PAS反应呈阳性。

  ③衍生脂质:指尚具有脂质性质的单纯脂质或复合脂的水产物,属于这类的有脂肪酸和固醇类。

  脂肪酸:硫酸耐尔蓝阳性,PAS阴性。

  胆固醇及其酯:Schultz试验阳性。

  组织化学的脂类物质:

  1、中性物质,如甘油三酯,胆固醇及其酯,类固醇和某些糖酯。

  2、酸性脂质,脂肪酸,磷脂。

  二、苏丹III IV联合法(combined SudanIII IV method for lipids)

  1、脂类组织的固定及固定液

  脂类组织的固定特别要注意的问题,就是不要选择含酒精的固定液,因为酒精可把脂类物质溶解,因此,用于脂类物质的首选固定液是甲醛,它可较好地保存脂类物质。

  2、试剂的配制:苏丹III0.2g,70%酒精50ml;苏丹IV0.5g丙酮50ml。

  3、操作步骤:

  (1)用经过甲醛固定过的组织作冰冻切片,厚约10-15um,切完后放入蒸馏水中,染色前放入50%-70%酒精洗。

  (2)入苏丹III IV染液染5分钟,

  (3)70%酒精分化,

  (4)水洗,

  (5)苏木素浅染细胞核,

  (6)水洗,必要时分化,

  (7)蓝化,如为漂浮染色,此时应将切片附贴于载片,

  (8)甘油明胶封固。

  结果:脂类物质呈现橘红色或鲜红,核蓝色。

来源:上海创赛科学仪器有限公司作者:上海创赛科技有限公司

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