一、作品简介
器官移植是20世纪人类医学科学的重大进展，自从上世纪60年代开始在临床应用以来，器官移植得到了突飞猛进的发展。目前器官移植是治疗终末期器官衰竭唯一有效的根治手段，并已经成为21世纪医学发展的主要方向之一。然而我国器官移植的医学教育还较落后，目前主要依靠少量的书本和课堂教学，由于受教学手段的限制，实验教学严重缺乏，器官移植教学的质量和效果均不理想，无法满足我国器官移植的发展需要。
目前虽然大鼠肝、肾同种异体移植模型是器官移植实验教学的理想动物模型，但是大鼠同种异体移植模型手术难度大、学习周期长、成功率低、重复性差，尤其不适用于短时间的大批量实验。针对这一情况，我研制开发了CZ-1型大鼠肝、肾离体机械灌注系统，该系统简单易行，技术要求较低，通用性好，可进行大批量实验，特别适用器官移植的实验教学。该系统可用于：①移植器官的切取;②器官保存(单纯低温保存和机械灌注保存);③移植器官缺血再灌注等器官移植相关内容的实验教学。
1. CZ-1 型离体灌注系统： CZ-1 型离体灌注系统见图1。该循环灌注系统包括：一个恒温水浴锅，一个数显恒流泵，一个四口烧瓶，一个液体流量计，一个自制水柱式压力计，一个由玻璃漏斗及玻璃培养皿组成的器官盛放皿、一套铁架台和包括过滤及除泡装置的一套循环管路。循环管路的一端连接直径1.2mm注射针头(肝脏)或0.6 mm注射针头(肾脏)，通过与门静脉插管相连进入门静脉或直接插入肾动脉，另一端同四口烧瓶的灌注液回收口相连。四口烧瓶作为灌注液保存和收集装置，置于恒温水浴锅中，四口分别为：灌注液流出口，灌注液回收口，气体灌入口和气体排出口。通过调节泵的转速来控制灌注液的流量，而流量计和压力计则分别监测灌注过程中流量和压力的变化。
2. 器官切取(以肝脏切取为例)：大鼠肝脏切取过程可模拟临床供者器官的切取。大鼠麻醉后将固定在自制的手术台上，背部垫一5ml注射器，使上腹部抬起。腹部备皮、剑突下至耻骨上作大“十”字切口进腹。剪断肝周各韧带及肝胃韧带，将肝脏向上翻起，用湿棉片覆盖肝脏加以保护;分离胆总管，在距肝门分叉0.5cm处的胆总管前壁作斜切口，插入胆道支架管， 用6-0线结扎固定，剪断远端胆管;打开肝十二指肠韧带，从肠系膜上静脉和脾静脉汇合处游离门静脉至肝门部，带线牵引备用;以湿盐水纱布覆盖肠管并推向左侧腹部，暴露左侧后腹膜，剪开后腹膜，以棉签钝性分离，游离左肾静脉水平以下的腹主动脉，直至腹主动脉分叉处，以备灌注插管;经肝下下腔静脉注入含肝素100单位的生理盐水1m1，使供体肝素化;用血管夹于左肾静脉稍下方阻断腹主动脉，腹主动脉分叉处上方剪一斜切口，插入静脉留置针，留置针连接距离高度为lm的灌注吊瓶，内含4℃ 乳酸林格液;打开膈肌，于膈肌水平之上钳夹胸主动脉，移去阻断腹主动脉值血管夹，开始滴注乳酸林格液，持续1min，与此同时在左肾静脉上方和胸腔内分别切断肝上、下的下腔静脉，让灌洗液顺利流出，使供肝呈现质地均匀黄白色;进行灌注的同时用4℃冷乳酸钠林格液不断浇淋肝脏;随后门静脉插入直径2mm聚乙烯导管并牢固结扎固定。
将200ml离体灌注液倒入四口烧瓶中，如进行缺血再灌注的实验教学则将水浴温度控制在60-65℃之间(根据环境温度调整)，而如进行器官低温机械灌注保存的教学则采用4℃冰水浴。开动恒流泵，调整灌注液循环流速为20ml/min(约3ml/min? g 肝组织)，同时打开95%O2-5%CO2混合气瓶开始气体氧合，调整气体流量为1L/min。循环20min后温度计测定灌注液入肝端温度，通过调整水浴温度，维持循环管路入肝端温度为37℃。再将肝脏置于玻璃培养皿中，将门静脉插管与循环管路入肝端相连，注意排出管路中的气泡以防栓塞。灌注液自肝上下腔静脉流出后，部分存留在玻璃培养皿中，使肝脏悬浮在灌注液中，余灌注液回流四口烧瓶。肝脏机械灌注情况，肾脏机械灌注情况。
作品名称：CZ-1型大鼠肝、肾离体机械灌注系统
完成单位：第二军医大学第二附属医院
