重点分析 ELISA试剂盒洗涤的两大方法

中国教育装备采购网2014-11-28 10:23围观1022次我要分享

  ELISA实验中为什么要洗涤?这一步骤有那么重要吗?

  洗涤虽不是一个反应步骤,但却也决定着实验的成败。ELISA靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。

重点分析 ELISA试剂盒洗涤的两大方法

  重点分析:ELISA试剂盒洗涤的两大方法

  一、浸泡式

  1.吸干或甩干孔内反应液;

  2.用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去);

  3.浸泡,即将洗涤液注满板孔,放置1-2分钟,间歇摇动,浸泡时间不可随意缩短;

  4.吸干孔内液体。吸干应彻底,可用水泵真空泵抽吸,也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干;

  5.重复操作c和d,洗涤3-4次(或按说明规定)。在间接法中如本底较高,可增加洗涤次数或延长浸泡时间。

  二、流水冲洗式

  最初用于小珠载体的洗涤,洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水。洗涤时附接一特殊装置,使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗,持续冲洗 2分钟后,吸干液体,再用蒸馏水浸泡2分钟,吸干即可。浸泡式犹如盆浴,流水冲洗式则好比淋浴,其洗涤效果更为彻底,且也简便、快速。已有实验表明,流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤。洗涤时设法加大水流量或加大水压,让水流冲击板孔表面,洗涤效果更佳。

来源:上海恒远生物科技有限公司作者:上海恒远生物科技有限公司

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