教育装备采购网
河南大学体育论坛580*60 第六届图书馆论坛580*60

上海嘉鹏针对RNA酶污染的预防措施

教育装备采购网 2016-04-13 10:54 围观1352次

  RNA的的化学性质比DNA活跃得多。RNA分子上紧邻磷酸二脂键的2′羟基基团能直接被RNA酶利用来作为活性因子,从而使得RNases无需金属离子就能发挥活性。由于RNA酶在环境中广泛存在,特别是RNase A,结构极其稳定,不能通过高温高压灭菌失活,因而极难消除,对保持RNA样品的完整性构成极大的威胁。由于RNase A类酶依赖于活性位点处的组氨酸残基起催化作用,因此能被组氨酸烷化剂DEPC所抑制。为了避免RNA降解,RNA相关实验都严格应遵循下述操作规则:

  1.使用RNase-free溶液;

  2.佩戴清洁一次性手套并经常更换;

  3.建立RNA工作专区,使用专用的移液器和RNase-free枪头;

  4.使用无菌的一次性塑料器皿,尽量避免使用玻璃器皿;

  5.金属工具可以用快速灼烧数秒钟的方式来快速消除污染;

  6.玻璃器皿可在180℃以上温度下烘焙数小时,或用新鲜配制的0.1%(v/v) DEPC或无水乙醇浸泡一小时后,高压灭菌去除残余的DEPC;

  7.电泳槽等含聚碳酸脂或聚苯乙烯材料的器皿应该在3%的过氧化氢中浸泡10分钟,然后用大量的RNase-free水冲洗干净后使用;

  8.塑料制品可用新鲜配制的0.1% (v/v) 的DEPC水浸泡过夜,然后高温高压灭菌1小时水解残留的DEPC;

  9.试剂处理:

  1)每升溶液中加入1 ml的DEPC,室温振荡过夜或37℃振荡1小时后,高温高压灭菌1小时水解残留的DEPC;

  2)由于DEPC可以和初级氨基基团起反应,故含Tris的溶液不宜用DEPC处理。应使用新开瓶(RNA专用)的Tris粉末,溶于DEPC处理水或Milli-Q水中,适用RNA专用电极调整pH值后,高温高压灭菌;

  3)对于遇热不稳定的化合物(如DTT、核苷、锰盐等),应直接将其(最高纯度)溶于DEPC处理水或Milli-Q水中,使用0.2 μm的滤膜过滤灭菌;

  4)无水乙醇、异丙醇等试剂开瓶后作RNA专用;75%乙醇应使用无水乙醇与DEPC处理水配制;

  5)反应体系中添加RNA酶抑制剂。

点击进入上海嘉鹏科技有限公司展台查看更多 来源:上海嘉鹏科技有限公司 我要投稿
校体购终极页

相关阅读

  • RNAplant植物RNA提取试剂
    教育装备采购网12-28
    产品简介:RNAplant植物RNA提取试剂RNAplant试剂可从植物组织,特别是富含多酚或淀粉的植物组织中(如马铃薯块茎,白松松针或嫩苗,和西红柿叶等)提取高纯度的总RNA。每100ml可处理100mg组织20...
  • RNAplant植物RNA提取试剂说明书
    教育装备采购网12-04
    RNAplant植物RNA提取试剂说明书RNAplant试剂可从植物组织,特别是富含多酚或淀粉的植物组织中(如马铃薯块茎,白松松针或嫩苗,和西红柿叶等)提取高纯度的总RNA。每100ml可处理100mg组织200次。...
  • RNA提取常见问题及注意事项
    教育装备采购网11-07
    1.RNA在细胞内极易降解,样本选择时一定要选取新鲜的样本组织或者取样后迅速低温处理(液氮速冻);样本出现多次反复冻融后,RNA得率会严重下降,也会导致RNA降解;RNA提取环境要保持无RNA酶污染...
  • 生物技术能让RNA药物更安全吗?上海创赛
    教育装备采购网01-10
    导读致力于罕见病研究的美国生物技术公司现代疗法的掌舵人PaoloMartini曾拜访过中东。他在那里遇到了一些治疗甲基丙二酸血症(MMA)患儿的医生。甲基丙二酸血症是一种罕见的代谢紊乱症,患者的血液...
  • 抑制RNA聚合酶就能延长寿命!
    教育装备采购网12-04
    导读伦敦大学学院UCL领导的研究发现:果蝇和线虫的寿命可以通过对一种在动物身上很普遍的酶的活性进行限制而延长。相关研究于11月29日在线发表在Nature上。这一文章揭示:酵母细胞的存活期、果蝇...
  • 嘉鹏科技特装参展第50届全国高教仪器设备展
    教育装备采购网10-23
    作为高等教育领域举办时间最长、规模最大、影响力最强的专业品牌展会,全国高教仪器设备展示会创立于1992年秋,嘉鹏科技就参加了首届展会,以后每年春、秋两届均有参加,延续至今。高教会被誉为...
  • 2018亚洲实验仪器、分析检测设备技术展
    教育装备采购网10-23
    About展会信息【展会时间】2018年4月4-6日【展会地址】雅加达国际展览中心【展出内容】分析系统、测量校准、农业检测、医用诊断技术、、实验室仪器、职业健康及劳防、科学装备【展会回顾】LAB-I...
  • 2017第三届中国国际化学药仿创开发论坛
    教育装备采购网10-19
    随着国家仿制药一致性评价工作紧锣密鼓的推行,化学仿制药面临着日益严峻的对照与等效试验。与此同时,企业针对于改良新药、超级仿制药、me-better、me-best药物等一系列仿创新药也在寻求差异化...

版权与免责声明:

① 凡本网注明"来源:教育装备采购网"的所有作品,版权均属于教育装备采购网,未经本网授权不得转载、摘编或利用其它方式使用。已获本网授权的作品,应在授权范围内使用,并注明"来源:教育装备采购网"。违者本网将追究相关法律责任。

② 本网凡注明"来源:XXX(非本网)"的作品,均转载自其它媒体,转载目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点和对其真实性负责,且不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。如其他媒体、网站或个人从本网下载使用,必须保留本网注明的"稿件来源",并自负版权等法律责任。

③ 如涉及作品内容、版权等问题,请在作品发表之日起两周内与本网联系,否则视为放弃相关权利。

九牧