三氯蔗糖又名三氯半乳蔗糖,俗称蔗糖素,由英国泰莱公司(Tate&Lyie)与伦敦大学共同研制并于1976年申请专利的一种新型甜味剂。由于其具有甜度高(甜度为蔗糖的600倍)、甜味纯正等特点,被认为是目前最优秀的功能性甜味剂之一,代表了目前强力甜味剂研究的最高水平。虽然科学家们经过长期的毒理实验证明其具有较高的安全性,但也有三氯蔗糖可诱发偏头疼发作的报道。
建立食品中三氯蔗糖的测定方法,可为食品生产企业提供生产性指导,并为质量监督部门提供食品质量监管依据。我国国家标准《GB 22255-2014 食品安全国家标准 食品中三氯蔗糖(蔗糖素)的测定》中制定了三氯蔗糖的HPLC-ELSD检测方法。
方法优势:
迪马科技在参考国家标准《GB 22255-2014 食品安全国家标准 食品中三氯蔗糖(蔗糖素)的测定》基础上,进行了方法优化,推出《食品中三氯蔗糖的测定》方法,该方法:
-
采用固相萃取-高效液相色谱法测定食品中的三氯蔗糖,使用ProElut PLS 固相萃取柱净化样品,通过HPLC-ELSD检测;
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前处理步骤简单、净化效果好、重现性好,定量限7.5 mg/kg,符合《GB 22255-2014 食品安全国家标准 食品中三氯蔗糖(蔗糖素)的测定》对三氯蔗糖的限量规定;
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适用于各省市出入境、质检、疾控、食品药品检验所、第三方检测机构、食品检测机构、大型食品生产商、高校和科研院所等。
以下为详细解决方案,敬请参考!
食品中三氯蔗糖的测定——HPLC法
1、适用范围
本方案适用于液态奶、酸奶、酱油、醋、饼干、奶酪、奶茶、可乐和果冻中三氯蔗糖的检测,方法定量限7.5 mg/kg。
2、标准品配制
标准储备溶液:准确称取标准品,用水配制成10 mg/mL的储备液,吸取一定体积10 mg/mL储备液用水配成浓度为1000 μg/mL的储备液。
3、提取
3.1 含蛋白脂肪类液体:液态奶、酸奶、酱油和醋
10 mL样品,加入8 mL 水和2 mL 200 g/L乙酸铅溶液,振荡2 min,超声提取5 min,6000 rpm离心5 min,取10 mL上清液,待净化;
3.2 含蛋白脂肪类固体:饼干、奶酪和奶茶
5 g样品,加入8 mL 水和2 mL 200 g/L乙酸铅溶液,振荡2 min,超声提取5 min,6000 rpm离心5 min,取10 mL上清液,待净化;
3.3 饮料:可乐(量取前超声排气泡)
10 mL样品,加入10 mL 水,混匀,取10 mL,待净化;
3.4 果冻
5 g样品,加入5 mL 水,热水超声溶解,混匀,趁热净化。
注:《GB 22255-2014 食品安全国家标准 食品中三氯蔗糖(蔗糖素)的测定》中提取液为75%甲醇水溶液,减压浓缩过程中暴沸严重,不易操作。
4、净化——ProElut 200 mg/6 mL PLS(Cat.#:68012)
(1)活 化: |
依次向柱中加入5 mL甲醇、5 mL水,弃去流出液; |
(2)上 样: |
将待净化液加入柱中,弃去流出液(控制流速不超过每秒1滴); |
(3)淋 洗: (4)洗 脱: |
向柱中加入5 mL 20%甲醇水溶液,弃去流出液; 向柱中加入3 mL甲醇,收集流出液; |
(5)定 容: |
将洗脱液在50 ℃下减压蒸干,用流动相定容至1 mL,供HPLC分析。 |
5、色谱条件
色谱柱:Diamonsil C18(2) 150 × 4.6 mm,5 μm(Cat.#:99601)
流速:1.0 mL/min
进样量:20 μL
柱温:35 ℃
检测器:SEDEX LT-ELSD,温度:40℃,压力:3.5 bar,Gain:6
流动相:A:水;B:乙腈
梯度设置
时间/Min. |
0 |
14 |
15 |
22 |
23 |
30 |
A(%) |
89 |
89 |
10 |
10 |
89 |
89 |
B(%) |
11 |
11 |
90 |
90 |
11 |
11 |
6、添加回收结果
食品中三氯蔗糖的HPLC检测的添加回收结果
添加水平200 mg/kg |
添加水平20 mg/kg |
添加水平7.5 mg/kg |
空白含量(μg/mL) |
||||
回收率(%) |
加标量 |
回收率(%) |
加标量 |
回收率(%) |
加标量 |
||
早餐奶 |
99.01 |
10 mg/mL 200 μL |
109.82 |
1000 μg/mL 200 μL |
96.52 |
1000 μg/mL 75 μL |
— |
巧克力奶 |
99.70 |
10 mg/mL 200 μL |
100.91 |
1000 μg/mL 200 μL |
95.88 |
1000 μg/mL 75 μL |
— |
咖啡奶 |
100.34 |
10 mg/mL 200 μL |
112.34 |
1000 μg/mL 200 μL |
126.00 |
1000 μg/mL 75 μL |
— |
养乐多 |
128.83 |
10 mg/mL 200 μL |
— |
— |
— |
— |
130.8 |
酸奶 |
— |
— |
105.58 |
1000 μg/mL 200 μL |
123.42 |
1000 μg/mL 75 μL |
— |
酱油 |
77.85 |
10 mg/mL 200 μL |
— |
— |
— |
— |
113.48 |
醋 |
108.22 |
10 mg/mL 200 μL |
143.64 |
1000 μg/mL 200 μL |
205.47 |
1000 μg/mL 75 μL |
— |
饼干 |
— |
— |
102.64 |
1000 μg/mL 100 μL |
103.28 |
1000 μg/mL 37.5 μL |
— |
奶酪 |
— |
— |
88.04 |
1000 μg/mL 100 μL |
82.78 |
1000 μg/mL 37.5 μL |
— |
奶茶 |
— |
— |
101.48 |
1000 μg/mL 100 μL |
169.05 |
1000 μg/mL 37.5 μL |
— |
可乐 |
— |
— |
103.97 |
1000 μg/mL 200 μL |
98.49 |
1000 μg/mL 75 μL |
— |
果冻 |
— |
— |
93.89 |
1000 μg/mL 100 μL |
96.27 |
1000 μg/mL 37.5 μL |
— |
食品中三氯蔗糖的测定——HPLC法相关产品信息:
货号 |
名称 |
规格 |
样品前处理 |
||
68012 |
ProElut PLS |
200 mg/6 mL, 30/pk |
244358 |
12管防交叉污染真空SPE萃取装置 |
12位 |
4803 |
1,3,6mL柱管通用连接器 |
15/pk |
4806 |
考克(控制流量) |
15/pk |
99011 |
真空/正压两用泵,无油 |
1/pk |
99013 |
抽滤瓶套装 (包括硅橡胶管2米,2L抽滤瓶及橡胶塞) |
1/pk |
30039 |
FitMax针头式过滤器 Nylon |
13 mm,0.22 μm 100/pk |
30040 |
FitMax针头式过滤器 Nylon |
13 mm,0.45 μm 100/pk |
标准品 |
||
53-69293-100G |
三氯蔗糖[56038-13-2] |
100 g |
色谱柱及保护柱 |
||
99601 |
Diamonsil C18(2) |
150 × 4.6 mm,5 μm |
HPLC溶剂�缓冲盐�离子对试剂 |
||
50101 |
乙腈 HPLC级 |
4 L |
50102 |
甲醇 HPLC级 |
4 L |
通用色谱产品 |
||
52401B |
瓶架/蓝色(现货) |
50孔 |
52401A |
瓶架/白色(现货) |
50孔 |
1034 |
样品瓶(棕色/螺纹) |
2 mL, 100/pk |
1035 |
样品瓶盖/含垫(已经组装) |
100/pk |
H80465 |
HPLC 进样针 |
25 μL |
红色产品货号#30039、#30040、#1034、#1035火热促销中