细胞培养
细胞培养:也称细胞克隆技术,通过细胞培养得到大量的细胞或其代谢产物。因为生物产品都是从细胞中得来的,所以可以说细胞培养技术是生物技术中最核心、最基础的技术。在细胞培养过程中经常会使用促生长因子,例如Insulin、IGF-I、LR3I GF-I和EGF等对细胞生长增殖起到了至关重要的作用。
细胞的生长需要营养环境,用于维持细胞生长的营养基质称为培养基。培养基按其物理状态可分为液体培养基和固体培养基。液体培养基用于大规模的工业生产以及生理代谢等基本理论的研究工作。液体培养基中加入一定的凝固剂(如琼脂)或固体培养物(如麸皮、大米等)便成为固体培养基。固体培养基为细胞的生长提供了一个营养及通气的表面,在这样一个营养表面上生产的细胞可形成单个菌落。因此,固体培养基在细胞的分离、鉴定、计数等方面起着相当重要的作用。
从多细胞生物中分离所需要细胞和扩增获得的细胞以及对细胞进行体外改造,观察,必须解决细胞离体培养问题,同微生物细胞培养的难易相比,比较困难的是来自多细胞生物的单细胞培养,特别是动物细胞的培养。细胞培养泛指所有体外培养,其含义是指从动物活体体内取出组织,于模拟体内生理环境等特定的体内条件下,进行孵育培养,使之生存并生长。细胞培养工作现已广泛应用于生物学、医学、新药研发等各个领域,成为最重要的基础科学之一。
细胞培养的一般过程主要包括四个方面:准备工作、取材、培养、冻存及复苏。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌等;取组织时应严格保持无菌,同时也要避免接触其他的有害物质;培养最重要的是观察,包括细胞是否生长良好,形态是否正常,有无污染;冻存的温度一般用液氮的温度--196℃。
细胞培养的优点:能长期传代,保持活性,便于监控检测结构功能和生命活动;培养条件可以人为的控制便于研究细胞代谢、物理、化学、生物因素的影响;可用于各种观察和检测手段研究活细胞的变化(变异、分化)。可从细胞水平开展亚细胞结构和代谢分子的表达;研究范围和细胞来源广泛,选择性广;不同代次细胞可长期保存,既可开展同代次不同条件和方法研究,又可观察不同代次的动态变化;耗资少、经济、成本低、可大量培养,利于生物制品的生产。
折叠
缺点:细胞或组织生长在人工环境中,与体内环境存在差异,细胞或组织的形态或功能会发生不同程度的改变。