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 克伦特罗(Clenbuterol)定量检测试剂盒(化学发光法)
  • 克伦特罗(Clenbuterol)定量检测试剂盒(化学发光法)
  • 克伦特罗(Clenbuterol)定量检测试剂盒(化学发光法)

    参考价格: ¥0.00
    产品型号:克伦特罗,Clenbuterol,定量检测试剂盒,化学发光法, (48T/96T)
    所在地区:上海
    上架时间:2012年09月25日
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    详细说明
    克伦特罗(Clenbuterol)定量检测试剂盒(化学发光法)
    使用说明书
    一、概要
    克仑特罗(Clenbuterol)属于β-兴奋剂,是一种高选择性的兴奋剂和激素,具有水解脂肪、合成代谢和对非条纹肌肉组织的松弛作用。近年来被非法添加到饲料中以提高脂肪型动物的瘦肉率和加速动物生长,因其添加剂量是治疗剂量的5-10倍,以至于在动物体内残留而给消费者带来危害。
    通常情况下,HPLC或GC-MS是克伦特罗残留检测的确证方法,但是其前处理步骤繁琐、费用昂贵。酶联免疫快速检测试剂盒具有成本低廉、操作简便、一次处理样本量大等优点,已成为常规的初步筛查方法。本试剂盒是应用化学发光技术研发的新一代药物残留检测产品,与仪器分析技术相比具有快速、简便、准确和灵敏度高等特点,操作时间仅需60分钟,能最大限度地减少操作误差和工作强度。
    二、用途
    定量检测动物尿液中克仑特罗(Clenbuterol)的残留。
    三、检测原理
    本试剂盒采用竞争酶联免疫试验。检测的基础是抗原抗体反应,微孔板预包被羊抗鼠IgG捕获抗体,加入鼠抗克伦特罗抗体后,会与捕获抗体连接。经过孵育及洗板后,加入标准品、样品及克伦特罗酶标记物(Clen-HRP),游离的克伦特罗(Clen)与克伦特罗酶标记物(Clen-HRP)竞争克伦特罗抗体结合位点。经过孵育及洗板后,加入底物并孵育。结合的酶连接物催化底物发光,发光值与样品中的克伦特罗浓度成反比,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数即可得出样品中克仑特罗的含量。
    四、检测限
    检测限:0.05ng/ml(0.05ppb)
    五、特异性
    克仑特罗 ……………………………………………100%
    沙丁胺醇 …………………………………………约10%
    特普他林 …………………………………………小于10%
    非诺特罗 ……………………………………………小于1%
    马布特罗 ……………………………………………约30%
    西马特罗 ……………………………………………小于1%
    溴布特罗 ……………………………………………越92%
    塞曼特罗 ……………………………………………小于1%
    异丙肾上腺素 ………………………………………小于1%
    六、试剂盒组成
    每一个盒中的试剂足够进行 96 个试验(包括标准测定),试剂盒中的组份如下:
    1、96孔发光板1块(8孔×12条):预包被羊抗鼠IgG
    2、标准液×6瓶(1ml/瓶):
    0ng/mL、0.1ng/mL、0.3ng/mL、0.9ng/mL、2.7ng/mL、8.1ng/mL
    3、11×酶连接物浓缩液(0.6mL):辣根过氧化物酶标记的克伦特罗浓缩液
    4、11×克伦特罗抗体浓缩液(1.3mL):鼠抗克伦特罗单克隆抗体
    5、底物液A(6mL):过氧化脲
    6、底物液B(6mL):鲁米诺
    7、浓缩洗涤液(25×)(25mL):含Tween-20的磷酸盐缓冲液(PBS)
    8、缓冲工作液(25mL):含稳定成分的磷酸盐缓冲液(PBS)
    9、其他:封板膜2张,自封袋1个,说明书1份
    七、样本处理
    处理任何样本,必须使用一次性吸头,在吸取不同的试剂时要更换吸头。取50μL清亮尿样直接测定,如尿样浑浊3000转离心10min,取上层清亮尿液测定,暂不使用的样本应于-20℃冷冻保存。
    八、检测步骤
    检测前的准备
    1、将所需试剂从冷藏环境中取出,置于室温(20-25℃)平衡30min以上。
    2、酶标记物为浓缩液。由于稀释后酶标记物的弱稳定性,所以只稀释实际需用量的酶标记物。轻轻摇匀浓缩液,吸取所需数量,用缓冲工作液以1:11(1+10)的比例,稀释11×酶连接物浓缩液(比如:400μL浓缩液+4.0mL缓冲液,足够4个微孔板条用)。
    3、克伦特罗抗体为浓缩液。由于稀释后抗体的弱稳定性,所以只稀释实际需用量的抗体。轻轻摇匀浓缩液,吸取所需数量,用缓冲工作液以1:11(1+10)的比例,稀释11×克伦特罗抗体浓缩液(比如:400μL浓缩液+4.0mL缓冲液,足够4个微孔板条用)。
    检测操作
    仔细的洗涤非常重要。避免在操作过程中微孔出现干燥。
    1、准备:取出需要数量的微孔板,将用剩的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。将微孔板条插入微孔架,标准品和样品做两个平行实验,记录下标准品和样品的位置。
    2、加抗体:每孔加入100μL稀释后的抗体溶液,37℃恒温箱孵育30分钟。
    3、洗板:倒出孔中的液体,将微孔架倒置在干净吸水纸上拍打,以保证完全除去孔中的液体。每孔加满稀释后的洗涤工作液,静置20秒钟,甩去液体,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次。
    4、加标准品/样品:加入50μL标准品或处理好的样品到各自的微孔中,标准品和样品做两个平行实验,然后加入50μL稀释后的酶连接物到微孔,小心地充分混合,37℃恒温箱孵育30分钟。
    5、重复3的操作。
    6、发光:每孔先加入底物液A 50μL,再加入底物液B 50μL,37℃避光孵育15min。
    7、测定:于发光仪上测定每孔发光值。
    九、结果判定
    (1)百分吸光率的计算,标准品或样本的百分发光值率等于标准品或样本的百分发光值的平均值(双孔)除以第一个标准(0标准)的发光值,再乘以100%,即
    百分发光值(%)= B ×100%
    B0
    B—标准溶液或样本溶液的平均发光值
    B0—0ppb标准溶液的平均发光值
    (2)标准曲线的绘制与计算
    以标准品百分发光率为纵坐标,以克仑特罗标准品浓度(ppb)的半对数为横坐标,绘制标准曲线图。将样本的百分发光率代入标准曲线中,从标准曲线上读出样本所对应的浓度,乘以其对应的稀释倍数即为样本中克仑特罗的实际浓度。
    若利用试剂盒专业分析软件进行计算,更便于大量样本的准确、快速分析。(欢迎来电索取)
    十、注意事项
    1、严格按照说明书操作时间,每加一种试剂前需要将其摇匀,各操作步骤紧凑进行。
    2、室温低于20℃或试剂及样本没有回到室温(20-25℃)会导致所有标准的OD值偏低。
    3、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况,则会出现标准曲线不成线性,重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。
    4、不要使用过了有效日期的试剂盒;也不要使用过了有效期的试剂盒中的任何试剂,掺杂使用过了有效期的试剂盒会引起灵敏度的降低;不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。
    5、反应终止液为2M硫酸,避免接触皮肤。
    十一、贮存条件及有效期
    贮存条件:2-8℃、干燥避光防潮。
    保存期:在正确贮存条件下,有效期为6个月。