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 线粒体融合蛋白1抗体
  • 线粒体融合蛋白1抗体
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    参考价格: ¥1530.00
    所在地区:上海
    上架时间:2013年03月11日
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    详细说明

    线粒体融合蛋白1抗体
    皂角刺 TLC法鉴别 121210-200502 1.0g
    鹿衔草 TLC法鉴别 121211- 0.5g
    番石榴叶 TLC法鉴别 121212-0101 0.5g
    矮地茶 TLC法鉴别 121213-0101 1.0g
    线粒体融合蛋白1抗体槐角 TLC法鉴别 121214-0101 0.5g
    藤黄 TLC法鉴别 121215-200602 0.1g
    抗体/蛋白A或/蛋白G微珠层析柱的制备与常见问题:
    蛋白A/蛋白G微珠—线粒体融合蛋白1抗体层析柱是用于抗原的亲和纯化最为通用的粒柱基质之一(Gersten和Marchalonisl978,Schneideretal.1982,SimanisandLanel985)。此类层析柱容易制备,由于抗体分子是通过Fc功能区与基质结合,抗原结合位点的确切定向可与抗原最大限度地发生作用。以下介绍的是设计用于蛋白质抗原的纯化,但类似的方案也适用于其他任何抗原。
    抗体可直接与蛋白A或蛋白G结合。根据抗体与蛋白A或蛋白G的亲和力,可以选用蛋白A或蛋白G微珠。一般推荐将蛋白A用于与小鼠单抗IsG2a、IgG2b和IgG3亚类连接,而将蛋白G用于IsGl。蛋白G用于与大鼠单抗连接,对于各种多克隆抗体,蛋白A适用于家兔、人、猪、脉鼠、狗或猫的样本,而蛋白G适用于小鼠、大鼠、绵羊、马、驴、牛或山羊的多克隆抗体。
    一旦抗体与蛋白A或蛋白G微珠结合后,再通过双功能连接剂将其交叉连接到基质上。可以使用任何双功能连接剂,但大多数人使用二甲基庚二酸酯(DMP),因其价廉而且易于掌握。DMP的2种结合基团相同,都能与游离的氨基结合、由于碳分子骨架有很大的韧性,大多数抗体/蛋白A或蛋白G组合在合适的距离内存在反应位点,故能有效地结合。偶然不能有效结合,可以使用带有不同长度碳原子空隙的其他交连剂。
    线粒体融合蛋白1抗体常见问题
    当抗体的游离氨基是与抗原结合的关键部位时,应用这种方法可能出现某些问题。此时,交连剂经常与抗原结合部位结合而阻断其与靶抗原的相互作用。
    当偶联是成功的,并且在事先的工作中亦证明该抗体用于免疫沉淀是有效的,据此可以推断是由于偶联过程破坏了抗体与抗原结合的能力。出现这种情况时,可采用两种途径解决:使用较少量的交连剂以减少与抗原识别位点的作用,或者使用不依靠-NH2基团的其他双功能交连剂。上述方法可以先用小量的抗体与蛋白A或蛋白G结合进行试验,操作过程类似于下面将要介绍的方法。
    值得注意的是,在使用此类亲和层析柱时,柱内没有与抗体交连的少量蛋白A和蛋白G分子与抗原制品中的无关抗体发生作用。因此,当此类层析柱用于纯化来自哺乳类动物抗原时,也可以纯化抗原制品中出现的抗体。这些问题是由于在纯化的抗原制品中混杂有重链和轻链多肽造成的。开始时应用不含有抗体的抗原制品进行纯化,或者是在抗原纯化之前或纯化后通过蛋白A或蛋白G层析柱去除制品中混杂的抗体,可以避免这类问题的发生。
    有时结合反应不完全,这些可发生在由于DMP试剂贮存不当,或者是抗体制品中含有其他带有游离氨基的化合物。在检测结合效果时,上述步骤如发现少量的重链即说明有结合不完全,见步骤(7)。当出现这种情况时,先用100mmol/L甘氨酸(pH2.8)洗涤结合的微珠,可以去除任何非共价结合于蛋白A或蛋白G分子上的抗体。如果问题很严重,整个结合反应必须在设置对照的情况下重复进行,以发现问题出现的步骤。根据我们的经验,问题通常出现在使用贮存不当的DMP,或由于洗涤和结合缓冲液的pH值太低。
    瓜蒌皮(栝楼) TLC法鉴别 121184- 2.0g
    双边瓜蒌皮 TLC法鉴别 121185- 2g
    安息香 TLC法鉴别 121186-200101 0.2g
    金钱草 TLC法鉴别 121187-200302 1.0g
    姜黄 TLC法鉴别 121188-200502 0.5g
    威灵仙 TLC法鉴别 121189- 2.5g
    钩藤 TLC法鉴别 121190-200402 2.0g
    桂枝 TLC法鉴别 121191-200402 0.5g
    夏天无 TLC法鉴别 121192-200101 1.0g
    钻山风 TLC法鉴别 121193-200703 25g
    紫金龙 TLC法鉴别 121194-200402 0.5g
    蒲公英 TLC法鉴别 121195- 0.5g
    熟地黄 TLC法鉴别 121196-200803 1.0g
    人工牛黄 TLC法鉴别 121197-200502 50mg
    小茴香 TLC法鉴别 121198-200301 2.0g
    秦艽(小秦艽) TLC法鉴别 121199-200702 1.0g
    大叶紫珠 TLC法鉴别 121200-200803 10.0g
    冬虫夏草 TLC法鉴别 121201-200502 1.0g
    杜仲 TLC法鉴别 121202-200502 1.0g
    昆明山海棠 TLC法鉴别 121203-200402 2.0g
    细辛(北细辛) TLC法鉴别 121204-200803 0.5g
    雪莲花(天山雪莲花) TLC法鉴别 121205-0101 1.0g
    毛诃子 TLC法鉴别 121206-0101 1.0g
    水翁花 TLC法鉴别 121207-0101 0.5g
    乌梅 TLC法鉴别 121208-200903 2.0g
    牛大力(美丽崖豆藤) TLC法鉴别 121209-200702 2.0g