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 锌指蛋白300抗体
  • 锌指蛋白300抗体
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    参考价格: ¥1530.00
    所在地区:上海
    上架时间:2013年03月12日
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    详细说明

    锌指蛋白300抗体
    Rabbit anti-horse IgG/AP 碱性磷酸酶标记兔抗马IgG 0.1ml
    Goat anti-rat IgG/FITC 荧光素标记羊抗大鼠IgG 0.3ml
    Rabbit anti-mouse IgG/AP 碱性磷酸酶标记兔抗小鼠IgG 0.1ml
    Rabbit anti-pig IgG/AP 碱性磷酸酶标记兔抗猪IgG 0.1ml
    锌指蛋白300抗体Rabbit anti-Guinea IgG/AP 碱性磷酸酶标记兔抗豚鼠IgG 0.1ml
    抗体/蛋白A或/蛋白G微珠层析柱的制备与常见问题:
    蛋白A/蛋白G微珠—锌指蛋白300抗体层析柱是用于抗原的亲和纯化最为通用的粒柱基质之一(Gersten和Marchalonisl978,Schneideretal.1982,SimanisandLanel985)。此类层析柱容易制备,由于抗体分子是通过Fc功能区与基质结合,抗原结合位点的确切定向可与抗原最大限度地发生作用。以下介绍的是设计用于蛋白质抗原的纯化,但类似的方案也适用于其他任何抗原。
    抗体可直接与蛋白A或蛋白G结合。根据抗体与蛋白A或蛋白G的亲和力,可以选用蛋白A或蛋白G微珠。一般推荐将蛋白A用于与小鼠单抗IsG2a、IgG2b和IgG3亚类连接,而将蛋白G用于IsGl。蛋白G用于与大鼠单抗连接,对于各种多克隆抗体,蛋白A适用于家兔、人、猪、脉鼠、狗或猫的样本,而蛋白G适用于小鼠、大鼠、绵羊、马、驴、牛或山羊的多克隆抗体。
    一旦抗体与蛋白A或蛋白G微珠结合后,再通过双功能连接剂将其交叉连接到基质上。可以使用任何双功能连接剂,但大多数人使用二甲基庚二酸酯(DMP),因其价廉而且易于掌握。DMP的2种结合基团相同,都能与游离的氨基结合、由于碳分子骨架有很大的韧性,大多数抗体/蛋白A或蛋白G组合在合适的距离内存在反应位点,故能有效地结合。偶然不能有效结合,可以使用带有不同长度碳原子空隙的其他交连剂。
    锌指蛋白300抗体常见问题
    当抗体的游离氨基是与抗原结合的关键部位时,应用这种方法可能出现某些问题。此时,交连剂经常与抗原结合部位结合而阻断其与靶抗原的相互作用。
    当偶联是成功的,并且在事先的工作中亦证明该抗体用于免疫沉淀是有效的,据此可以推断是由于偶联过程破坏了抗体与抗原结合的能力。出现这种情况时,可采用两种途径解决:使用较少量的交连剂以减少与抗原识别位点的作用,或者使用不依靠-NH2基团的其他双功能交连剂。上述方法可以先用小量的抗体与蛋白A或蛋白G结合进行试验,操作过程类似于下面将要介绍的方法。
    值得注意的是,在使用此类亲和层析柱时,柱内没有与抗体交连的少量蛋白A和蛋白G分子与抗原制品中的无关抗体发生作用。因此,当此类层析柱用于纯化来自哺乳类动物抗原时,也可以纯化抗原制品中出现的抗体。这些问题是由于在纯化的抗原制品中混杂有重链和轻链多肽造成的。开始时应用不含有抗体的抗原制品进行纯化,或者是在抗原纯化之前或纯化后通过蛋白A或蛋白G层析柱去除制品中混杂的抗体,可以避免这类问题的发生。
    有时结合反应不完全,这些可发生在由于DMP试剂贮存不当,或者是抗体制品中含有其他带有游离氨基的化合物。在检测结合效果时,上述步骤如发现少量的重链即说明有结合不完全,见步骤(7)。当出现这种情况时,先用100mmol/L甘氨酸(pH2.8)洗涤结合的微珠,可以去除任何非共价结合于蛋白A或蛋白G分子上的抗体。如果问题很严重,整个结合反应必须在设置对照的情况下重复进行,以发现问题出现的步骤。根据我们的经验,问题通常出现在使用贮存不当的DMP,或由于洗涤和结合缓冲液的pH值太低。
    Rabbit anti-dog IgG 兔抗狗IgG(亲和层析纯化) 10mg
    Rabbit anti-Goat IgM 兔抗羊IgM(亲和层析纯化) 1mg
    Rabbit anti-Guinea IgM 兔抗豚鼠IgM(亲和层析纯化) 10mg
    Rabbit anti-human IgG 兔抗人IgG(亲和层析纯化) 1mg
    Rabbit anti-horse IgG/HRP 辣根过氧化物酶标记兔抗马IgG 0.1ml
    Rabbit anti-human IgM/HRP 辣根过氧化物酶标记兔抗人IgM 0.1ml
    Rabbit anti-human sIgA 兔抗人分泌型IgA(亲和层析纯化) 1mg
    Rabbit anti-mouse IgG-Fc 兔抗小鼠IgG-Fc(亲和层析纯化) 10mg
    Rabbit anti-MK IgM 兔抗猴IgM(亲和层析纯化) 1mg
    Rabbit anti-mouse IgG1,kappa chain 兔抗小鼠IgG1k链(亲和层析纯化) 1mg
    Rabbit anti-rat IgM 兔抗大鼠IgM(亲和层析纯化) 1mg
    Rabbit anti-Mink IgG 兔抗水貂IgG(亲和层析纯化) 0.1ml
    Rabbit FITC 兔抗荧光素(FITC) 2mg
    Goat anti-Human HSA 羊抗人白蛋白(HSA) 2mg
    Bovine IgM (亲和纯化) 牛IgM 1mg
    Chicken IgM (亲和纯化) 鸡IgM 10mg
    Goat IgM (亲和纯化) 羊IgM 1mg
    Horse IgM (亲和纯化) 马IgM 1mg
    human IgM (免疫亲和纯化)人IgM 1mg
    human sIgA (亲和纯化) 人分泌型IgA 10mg
    Monkey IgG (亲和纯化) 猴IgG 50mg
    Rabbit anti-Mink IgG/HRP 辣根过氧化物酶标兔抗水貂抗体IgG 0.1ml
    Donkey anti-Goat IgG/HRP 辣根过氧化物酶标记驴抗羊IgG 0.1ml
    human-HSA/HRP 辣根过氧化物酶标记人血清白蛋白 1ml
    Rabbit anti-rat Ig/HRP 辣根过氧化物酶 标记的兔抗大鼠Ig 0.2ml
    Goat anti-Rabbit Ig/HRP 辣根过氧化物酶 标记的羊抗兔Ig 0.2ml
    human GAPDH polyclonal antibody /HRP 辣根过氧化物酶 标记的抗人GAPDH多抗 0.5ml
    Goat anti-Rabbit IgG/AP 碱性磷酸酶标记羊抗兔IgG 0.1ml
    Biotin/AP 碱性磷酸酶标记生物素 0.1ml
    Goat anti-mouse IgM/AP 碱性磷酸酶标记羊抗小鼠IgM 0.1ml
    Rabbit anti-MK IgG/FITC 荧光素标记兔抗猴IgG 0.3ml
    Rabbit anti-Dog IgG/FITC 荧光素标记兔抗狗IgG 0.3ml
    Rabbit anti-guinea pig IgM/FITC 荧光素标记兔抗豚鼠IgM 0.3ml
    Rabbit anti-Goat IgM/FITC 荧光素标记兔抗羊IgM 0.3ml
    Rabbit anti-human IgG/FITC 荧光素标记兔抗人IgG 0.3ml
    Goat anti-Bovine IgG/AP 碱性磷酸酶标记羊抗牛IgG 0.1ml
    Rabbit anti-human IgG/Streptavidin 链霉亲和素标记兔抗人IgG 1ml
    BSA/FITC 荧光素标记牛血清白蛋白 1ml
    Goat anti-bov IgM/FITC 荧光素标记羊抗牛IgM 0.3ml
    Goat anti-human IgA/FITC 荧光素标记羊抗人IgA 0.3ml
    Rabbit anti-human IgM/FITC 荧光素标记兔抗人IgM 0.3ml
    Rabbit anti-dog IgG/AP 碱性磷酸酶标记兔抗狗IgG 0.1ml