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 胞质紧密粘连蛋白1抗体
  • 胞质紧密粘连蛋白1抗体
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    参考价格: ¥1530.00
    所在地区:上海
    上架时间:2013年03月12日
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    详细说明

    胞质紧密粘连蛋白1抗体
    Rabbit anti-Goat IgG/PE 荧光素PE标记兔抗羊IgG 0.1ml
    Rabbit anti-Meiiones Unguiculataus Milme-Edwauds/PE 荧光素PE标记兔抗长爪沙鼠IgG 0.1ml
    Rabbit IgG/PE 荧光素PE标记兔IgG(细胞流式同型对照) 0.1ml
    Bovine IgG/PE 荧光素PE标记牛IgG 0.1ml
    胞质紧密粘连蛋白1抗体dog IgM/PE 荧光素PE标记狗IgM 0.1ml
    human IgG/PE 荧光素PE标记人IgG 0.1ml
    抗体/蛋白A或/蛋白G微珠层析柱的制备与常见问题:
    蛋白A/蛋白G微珠—胞质紧密粘连蛋白1抗体层析柱是用于抗原的亲和纯化最为通用的粒柱基质之一(Gersten和Marchalonisl978,Schneideretal.1982,SimanisandLanel985)。此类层析柱容易制备,由于抗体分子是通过Fc功能区与基质结合,抗原结合位点的确切定向可与抗原最大限度地发生作用。以下介绍的是设计用于蛋白质抗原的纯化,但类似的方案也适用于其他任何抗原。
    抗体可直接与蛋白A或蛋白G结合。根据抗体与蛋白A或蛋白G的亲和力,可以选用蛋白A或蛋白G微珠。一般推荐将蛋白A用于与小鼠单抗IsG2a、IgG2b和IgG3亚类连接,而将蛋白G用于IsGl。蛋白G用于与大鼠单抗连接,对于各种多克隆抗体,蛋白A适用于家兔、人、猪、脉鼠、狗或猫的样本,而蛋白G适用于小鼠、大鼠、绵羊、马、驴、牛或山羊的多克隆抗体。
    一旦抗体与蛋白A或蛋白G微珠结合后,再通过双功能连接剂将其交叉连接到基质上。可以使用任何双功能连接剂,但大多数人使用二甲基庚二酸酯(DMP),因其价廉而且易于掌握。DMP的2种结合基团相同,都能与游离的氨基结合、由于碳分子骨架有很大的韧性,大多数抗体/蛋白A或蛋白G组合在合适的距离内存在反应位点,故能有效地结合。偶然不能有效结合,可以使用带有不同长度碳原子空隙的其他交连剂。
    胞质紧密粘连蛋白1抗体常见问题
    当抗体的游离氨基是与抗原结合的关键部位时,应用这种方法可能出现某些问题。此时,交连剂经常与抗原结合部位结合而阻断其与靶抗原的相互作用。
    当偶联是成功的,并且在事先的工作中亦证明该抗体用于免疫沉淀是有效的,据此可以推断是由于偶联过程破坏了抗体与抗原结合的能力。出现这种情况时,可采用两种途径解决:使用较少量的交连剂以减少与抗原识别位点的作用,或者使用不依靠-NH2基团的其他双功能交连剂。上述方法可以先用小量的抗体与蛋白A或蛋白G结合进行试验,操作过程类似于下面将要介绍的方法。
    值得注意的是,在使用此类亲和层析柱时,柱内没有与抗体交连的少量蛋白A和蛋白G分子与抗原制品中的无关抗体发生作用。因此,当此类层析柱用于纯化来自哺乳类动物抗原时,也可以纯化抗原制品中出现的抗体。这些问题是由于在纯化的抗原制品中混杂有重链和轻链多肽造成的。开始时应用不含有抗体的抗原制品进行纯化,或者是在抗原纯化之前或纯化后通过蛋白A或蛋白G层析柱去除制品中混杂的抗体,可以避免这类问题的发生。
    有时结合反应不完全,这些可发生在由于DMP试剂贮存不当,或者是抗体制品中含有其他带有游离氨基的化合物。在检测结合效果时,上述步骤如发现少量的重链即说明有结合不完全,见步骤(7)。当出现这种情况时,先用100mmol/L甘氨酸(pH2.8)洗涤结合的微珠,可以去除任何非共价结合于蛋白A或蛋白G分子上的抗体。如果问题很严重,整个结合反应必须在设置对照的情况下重复进行,以发现问题出现的步骤。根据我们的经验,问题通常出现在使用贮存不当的DMP,或由于洗涤和结合缓冲液的pH值太低。
    bovine-BSA/AP 碱性磷酸酶标记标记牛血清白蛋白 0.1ml
    Goat anti-human IgG/Biotin 生物素化羊抗人IgG 1ml
    dog IgG/Cy3 荧光素Cy3标记狗IgG 0.1ml
    human IgG/Cy3 荧光素Cy3标记人IgG 0.1ml
    Monkey IgG/Cy3 荧光素Cy3标记猴IgG 0.1ml
    Rat IgM/Cy3 荧光素Cy3标记大鼠IgM 0.1ml
    Goat anti-mouse IgG/Biotin 生物素化羊抗小鼠IgG 0.1ml
    Goat anti-Rabbit IgG/Biotin 生物素化羊抗兔IgG(H+L) 0.1ml
    Goat anti-Chicken IgG/Biotin 生物素化羊抗鸡IgG 0.1ml
    Mouse anti-human IgG/Biotin 生物素化小鼠抗人IgG 0.1ml
    HSA(Human serum albumin) /Cy3 荧光素Cy3标记人血白蛋白 0.1ml
    Mouse anti-goat IgG/FITC 荧光素标记小鼠抗羊IgG 0.3ml
    Mouse anti-rabbit IgG/FITC 荧光素标记小鼠抗兔IgG 0.3ml
    Rabbit anti-chicken IgM/Biotin 生物素化兔抗鸡IgM 0.3ml
    Rabbit anti-Goat IgG/Biotin 生物素化兔抗羊IgG 0.1ml
    Rabbit anti-horse IgG/Biotin 生物素化兔抗马IgG 0.1ml
    Goat anti-mouse IgG/Cy5  荧光素Cy5标记羊抗小鼠IgG 0.1ml
    Goat anti-mouse IgG/Cy5.5 荧光素Cy5.5标记羊抗小鼠IgG 0.1ml
    Goat IgG/Cy5.5 荧光素Cy5.5标记羊IgG(细胞流式同型对照) 0.1ml
    Goat anti-human IgG/Cy7  荧光素Cy7标记羊抗人IgG 0.1ml
    MKP-2/DUSP4(Mitogen activated protein kinase phosphatase 2) 丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-2抗体 0.2ml
    Rabbit anti-human IgM/Biotin 生物素化兔抗人IgM 0.3ml
    Rabbit anti-mouse IgG-Fc/Biotin 生物素化兔抗小鼠IgG-Fc IgG 0.3ml
    Donkey human IgG/FITC 荧光素标记驴抗人IgG 0.3ml
    Donkey Guinea IgG/FITC 荧光素标记驴抗豚鼠IgG 0.3ml
    Chicken IgG/FITC 荧光素标记鸡IgG 0.3ml
    Guinea IgG/FITC 荧光素标记豚鼠IgG 0.3ml
    human IgG/FITC 荧光素标记人IgG 0.3ml
    Mouse IgM/FITC 荧光素标记小鼠IgM 0.3ml
    Rat IgG/FITC 荧光素FITC标记大鼠IgG(细胞流式同型对照) 0.3ml
    HSA(Human serum albumin)/FITC 荧光素标记人血白蛋白 0.5ml
    Goat anti-mouse IgG/Cy3 荧光素Cy3标记羊抗小鼠IgG 0.1ml
    BSA/Cy3 荧光素Cy3标记牛血清白蛋白 0.1ml
    Goat anti-chi IgM/Cy3 荧光素Cy3标记羊抗鸡IgM 0.1ml
    Goat anti-rat IgG/Cy3  荧光素Cy3标记羊抗大鼠IgG 0.1ml
    Mouse anti-goat IgM/Cy3 荧光素Cy3标记小鼠抗羊IgM 0.1ml
    Mouse anti-rat IgM/Cy3 荧光素Cy3标记小鼠抗大鼠IgM 0.1ml
    Rabbit anti-MK IgM/Cy3 荧光素Cy3标记兔抗猴IgM 0.1ml
    Rabbit anti-rat IgM/Cy3  荧光素Cy3标记兔抗大鼠IgM 0.1ml
    Rabbit anti-bov IgM/Cy3 荧光素Cy3标记兔抗牛IgM 0.1ml
    Rabbit anti-Goat IgG/Cy3 荧光素Cy3标记兔抗羊IgG 0.1ml
    Rabbit anti-human IgG/Cy3 荧光素Cy3标记兔抗人IgG 0.1ml
    rec Protein A/Cy3 荧光素Cy3标记重组纯化蛋白A 0.1ml
    Bovine IgG/Cy3 荧光素Cy3标记牛IgG 0.1ml
    Goat anti-Rabbit IgG/PE 荧光素PE标记羊抗兔IgG 0.1ml
    Goat anti-chi IgG/PE 荧光素PE标记羊抗鸡IgG 0.1ml
    Rabbit anti-human IgM/PE 荧光素PE标记兔抗人IgM 0.1ml
    Goat anti-Guinea IgG/PE 荧光素PE羊抗豚鼠IgG 0.1ml
    Mouse anti-rat IgM/PE 荧光素PE标记小鼠抗大鼠IgM 0.1ml
    Rabbit anti-Dog IgG/PE 荧光素PE标记兔抗狗IgG 0.1ml
    Rabbit anti-guinea pig IgM/PE 荧光素PE标记兔抗豚鼠IgM 0.1ml