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 大鼠胰高血糖素样肽1(Glp-1)ELISA Kit
  • 大鼠胰高血糖素样肽1(Glp-1)ELISA Kit
  • 大鼠胰高血糖素样肽1(Glp-1)ELISA Kit

    参考价格: ¥3000.00
    品  牌:USA
    产品型号:RC01574B (大鼠胰高血糖素样肽1(Glp-1)ELISA Kit)
    所在地区:上海
    上架时间:2012年08月01日
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    试剂的准备
    1. 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:
    40 ng/ml (6号标准品) 原倍浓度不用稀释直接加入50ul。
    20 ng/ml (5号标准品) 100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液
    10 ng/ml (4号标准品) 100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液
    5.0 ng/ml (3号标准品) 100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液
    2.5 ng/ml (2号标准品) 100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液
    1.25 ng/ml (1号标准品) 100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液
    0 ng/ml (空转移趋化生长因子β1对照) 原始浓度不用稀释直接加入50ul。

    2. 洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。

    操作步骤
    1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
    2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空转移趋化生长因子β1孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
    3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
    4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
    5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
    6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
    7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
    8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
    9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。