大鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)ELISA 试剂盒_中国教育装备采购网

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 大鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)ELISA 试剂盒
  • 大鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)ELISA 试剂盒
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    参考价格: ¥3000.00
    品  牌:USA
    产品型号:RC02044B (大鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)ELISA Kit)
    所在地区:上海
    上架时间:2012年08月01日
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    安全性
    1. 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
    2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
    3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

    操作注意事项
    1. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
    2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
    3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
    4. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
    5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
    6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
    7. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
    8. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
    9. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

    样品收集、处理及保存方法
    1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
    2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
    3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
    4、 组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液
    5、 保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

    试剂的准备
    1. 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:
    80 umol/L (6号标准品) 原倍浓度不用稀释直接加入50ul。
    40 umol/L (5号标准品) 100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液
    20 umol/L (4号标准品) 100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液
    10 umol/L (3号标准品) 100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液
    5.0 umol/L (2号标准品) 100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液
    2.5 umol/L (1号标准品) 100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液
    0 umol/L (空白对照) 原始浓度不用稀释直接加入50ul。

    2. 洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。


    操作步骤
    1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
    2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
    3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
    4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
    5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
    6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
    7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
    8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
    9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。