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 猪热休克蛋白70(HSP-70)ELISA Kit
  • 猪热休克蛋白70(HSP-70)ELISA Kit
  • 猪热休克蛋白70(HSP-70)ELISA Kit

    参考价格: ¥3000.00
    品  牌:USA
    产品型号:RC02608B (猪热休克蛋白70(HSP-70)ELISA Kit)
    所在地区:上海
    上架时间:2012年08月01日
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    操作步骤
    1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
    2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
    3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
    4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
    5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
    6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
    7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
    8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
    9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。

    建议使用的实验方案
     标准品浓度(pg/ml) 
    A 240 240 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
    B 120 120 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
    C 60 60 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
    D 30 30 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
    E 15 15 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
    F 7.5 7.5 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
    G 0 0 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
    H 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品


    局限
    6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。

    试剂盒性能
    1. 灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
    2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
    3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。

    结 果 判 断 与 分 析
    1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

    2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的IL-1β标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的IL-1β含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

    3、检测值范围:0-240pg/ml

    4、敏感度: 0.1 pg/ml