上海逸峰生物试剂有限公司

NKX2.5  Elisa kit

NKX2.5 Elisa kit

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产品型号:YF1325 (48T/96T)
所在地区:上海
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详细说明

NKX2.5  Elisa kit

NKX2.5 Elisa kit
ELISA试剂盒   规格: 48T/96T
上海逸峰生物试剂有限公司提供各种种属、各种系列ELISA检测试剂盒,仅适用于科研,不适用于临床诊断。公司提供免费代测,更好的为您服务。
Elisa试剂盒说明:
1.检测原理:采用双抗体夹心ABC-ELISA法
2.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
3.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
4.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
5.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
 
Elisa试剂盒组成
试剂盒组成
48孔配置
96孔配置
保存
说明书
1份
1份
 
封板膜
2片(48)
2片(96)
 
密封袋
1个
1个
 
酶标包被板
1×48
1×96
2-8℃保存
标准品:90μg/L
0.5ml×1瓶
0.5ml×1瓶
2-8℃保存
标准品稀释液
1.5ml×1瓶
1.5ml×1瓶
2-8℃保存
酶标试剂
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8℃保存
样品稀释液
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8℃保存
显色剂A液
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8℃保存
显色剂B液
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8℃保存
终止液
3ml×1瓶
6ml×1瓶
2-8℃保存
浓缩洗涤液
(20ml×20倍)×1瓶
(20ml×30倍)×1瓶
2-8℃保存
实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液) 100μl,37℃,60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后15分钟以内进行检测。
注:
1. 用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。
2. 每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是最后加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。
3. 为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。
4. 未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。
5. 建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。
洗板方法
手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。
自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
计算
以标准物的浓度为横坐标(对数坐标),OD值为纵坐标(普通坐标),在半对数坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
上海逸峰生物试剂有限公司长期提供各种系列酶免Elisa试剂盒、ELISA检测试剂盒,仅适用于科研,不适用于临床诊断。公司提供免费代测,
公司部分产品展示:
CD蛋白(损坏性关节炎)YKL-40 ELISA试剂盒
尿肌酸酐(Creatinine) ELISA试剂盒
25-羟基维他命D(25-OH-Vit D) ELISA试剂盒
吡啶啉/脱氧吡啶啉(PYD/DPD) ELISA试剂盒
白细胞三烯(C4/D4/E4) ELISA试剂盒
前列腺素D2-MOX ELISA试剂盒
二环-前列腺素E2 ELISA试剂盒
11b-前列腺素F2a ELISA试剂盒
CD蛋白(损坏性关节炎)YKL-40 ELISA试剂盒
尿肌酸酐(Creatinine) ELISA试剂盒