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人类似RIKEN cDNA 4931408D14 基因 ELISA试剂盒

人类似RIKEN cDNA 4931408D14 基因 ELISA试剂盒

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产品型号:SU5090 (48T/96T)
所在地区:华东 上海
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详细说明

人类似RIKEN cDNA 4931408D14 基因 ELISA试剂盒
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上海逸晗生物科技有限公司长期提供各种种属、各种系列Elisa试剂盒,标准品,对照品,生物试剂,科研抗体,细胞株等,生物耗材等,价格实惠,质量有保证,信誉第一。欢迎来电索取各ELISA试剂盒产品说明书。凡购买目录本公司ELISA检测试剂盒可免费提供代测服务。

待检样本可以为细胞培养上清液,血清, 血浆,尿液,组织液,心房水,体液标本等等,如果您准备代检测,请寄标本时需注明以下情况: 1、标本编号;2、所测项目;3、是否做复孔;3、联系方式;4、实验后标本是否寄回。

Elisa试剂盒检测原理:采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。

保存:2-8℃

样品收集、处理及保存方法

1.  血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.  血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.  细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.  组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5.  保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品

1.      酶标仪(450nm)

2.      高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.      37℃恒温箱

操作注意事项

1.  试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2.  实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。

3.  预处理后的样本无需稀释,直接取50μL加样即可。

4.  严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.  所有液体组分使用前充分摇匀。

试剂的准备

 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

洗板方法

1.  手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。

2.  自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。

操作步骤

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.  设置标准品孔、样本孔和空白孔,空白孔什么都不加;标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

3.  待测样本孔各加待测样本50μL;

4.  随后标准品孔和样本孔中(空白孔不加)加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.  弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6.  所有孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.  所有孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

结果判断

 绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。

 

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