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 人破骨细胞分化因子(ODF)ELISA Kit
  • 人破骨细胞分化因子(ODF)ELISA Kit
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    参考价格: ¥0.00
    适用范围:全领域
    所在地区:
    上架时间:2014年11月12日
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    详细说明

    人破骨细胞分化因子(ODF)ELISA Kit 


    试验原理:
    Glucagons试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知Glucagons浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将Glucagons和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中Glucagons的浓度呈比例关系。

    试剂盒内容及其配制
    试剂盒成份(2-8℃保存) 96孔配置 48孔配置 配制
    96/48人份酶标板 1块板(96T) 半块板(48T) 即用型
    塑料膜板盖 1块 半块 即用型
    标准品:400pg/ml 1瓶(0.6ml) 1瓶(0.3ml) 按说明书进行稀释
    空白对照 1瓶(1.0ml) 1瓶(0.5ml) 即用型
    标准品稀释缓冲液 1瓶(5ml) 1瓶(2.5ml) 即用型
    生物素标记的抗Glucagons抗体 1瓶(6ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
    亲和链酶素-HRP 1瓶(10ml) 1瓶(5.0ml) 即用型
    洗涤缓冲液 1瓶(20ml) 1瓶(10ml) 按说明书进行稀释
    底物A 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
    底物B 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
    终止液 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
    标本稀释液 1瓶(12ml) 1瓶(6.0ml) 即用型

    自备材料
    1. 蒸馏水。
    2. 加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
    3. 振荡器及磁力搅拌器等。

    安全性
    1. 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
    2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
    3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

    操作注意事项
    1. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
    2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
    3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
    4. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
    5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
    6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
    7. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
    8. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
    9. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
    样品收集、处理及保存方法
    1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
    2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
    3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
    4、 组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液
    5、 保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

    试剂的准备
    1. 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:
    400 pg/ml (6号标准品) 原倍浓度不用稀释直接加入50ul。
    200 pg/ml (5号标准品) 100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液
    100 pg/ml (4号标准品) 100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液
    50 pg/ml (3号标准品) 100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液
    25 pg/ml (2号标准品) 100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液
    12.5 pg/ml (1号标准品) 100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液
    0 pg/ml (空白对照) 原始浓度不用稀释直接加入50ul。

    2. 洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。
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