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人的血管内皮细胞生长因子-B(VEGF-B) Human Vascuoar endothelial cell growth factor B ELISA kit

人的血管内皮细胞生长因子-B(VEGF-B) Human Vascuoar endothelial cell growth factor B ELISA kit

参考价格:¥1500.00
品  牌:美国
产品型号:YH7646 (48T/96T)
所在地区:华东 上海
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详细说明

 人的血管内皮细胞生长因子-B(VEGF-B) Human Vascuoar endothelial cell growth factor B ELISA kit 

 

 

标本的稀释原则: 

    首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过程中,应做好详细的记录。最后计算浓度时,稀释了“N”倍,标本的浓度应再乘以“N”。 

    标准品的稀释原则:2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为300 pg/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml,临用前15分钟内配制。 

    如配制150 pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。 

    生物素标记抗体的稀释原则: 

    临用前以生物素标记抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。 

    辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则: 

    临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。 

    操作注意事项: 

    ● 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。 

    ● 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。 

    ● 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。 

    ● 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。 

    ● 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。 

    ● 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。 

    ● 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。 

    ● 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。 

    试剂盒组成 

    130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶 

    2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(16ng/L)0.5ml×1瓶 

    3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶 

    4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份 

    5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张 

    6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个 

    标本要求 

    1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融

    2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性

检测方法:酶联免疫法/酶免法(ELISA) 

    操作注意事项 

    1. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。 

    2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。 

    3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。 

    4. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。 

    5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品 

    6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。 

    7. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。 

    8. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。 

    9. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作,

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