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大鼠正常T细胞表达和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA kit

大鼠正常T细胞表达和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA kit

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品  牌:上海
产品型号:YH3022 (48T/96T)
所在地区:上海
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详细说明

大鼠正常T细胞表达和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA kit 

 

  ELISA试剂盒说明:

  1.检测原理:采用双抗体夹心ABC-ELISA法

  2.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。

  3.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。

  4.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。

  5.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。

  该Elisa试剂盒可检测样本:血液标本,组织液标本,尿液标本,粪便标本,脑脊液标本,胸腹水标本等(具体详细情况请咨询)

  Elisa试剂盒操作步骤(具体操作以说明书为准):

  实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。

  1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。

  为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

  2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。

  3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。

  4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液)100μl,37℃,60分钟。

  5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。

  6.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

  7.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

  8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后15分钟以内进行检测。

  注:

  1.用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。

  2.每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是最后加底物溶液及2NH2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。

  3.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。

  4.未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。

  5.建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。

  自备物品

  1.酶标仪(建议参考仪器使用说明提前预热)

  2.微量加液器及吸头,EP管

  3.蒸馏水或去离子水,全新滤纸

  

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