上海友腾生物科技有限公司

人二级淋巴组织趋化因子(SLC/CCL21)ELISA Kit

人二级淋巴组织趋化因子(SLC/CCL21)ELISA Kit

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品  牌:上海
产品型号:YH1676 (48T/96T)
所在地区:华东 上海
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详细说明

 人二级淋巴组织趋化因子(SLC/CCL21)ELISA Kit 

本公司主要经营Elisa试剂盒、
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗TPA抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗TPA抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TPA呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。 
试剂盒组成及试剂配制 
1. 酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。 
2. 标准品(Standard):2瓶(冻干品)。 
3. 样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。 
4. 生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。 
5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。 
6. 生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100) 
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100) 
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 
9. 浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 
10. 终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。 
 
需要而未提供的试剂和器材 
1. 标准规格酶标仪 
2. 高速离心机 
3. 电热恒温培养箱 
4. 干净的试管和Eppendof管 
5. 系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,最好用多通道移液器 
6. 蒸馏水,容量瓶等 
标本的采集及保存 
1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 
2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000 g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 
注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。 
标本的稀释原则: 
首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过程中,应做好详细的记录。最后计算浓度时,稀释了“N”倍,标本的浓度应再乘以“N”。 
标准品的稀释原则:2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 mU/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释200 mU/ml,100 mU/ml,50 mU/ml,25 mU/ml,12.5 mU/ml,6.25 mU/ml,3.12 mU/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 mU/ml,临用前15分钟内配制。 
如配制100 mU/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)200 mU/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。 
生物素标记抗体的稀释原则: 
临用前以生物素标记抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。 
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