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 人甲基化酶(Methylase)ELISA 试剂盒
  • 人甲基化酶(Methylase)ELISA 试剂盒
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    参考价格: ¥0.00
    品  牌:USA
    产品型号:48T/96T
    所在地区:上海
    上架时间:2012年09月28日
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    详细说明

    人甲基化酶(Methylase)ELISA 试剂盒

    产品名称:人甲基化酶(Methylase)ELISA 试剂盒                                                                                              

    规格:原装/96T ELISA试剂盒 分装 48T/96T ELISA试剂盒

    实验原理:

    案例分析:人E选择素(E-Selectin)

       本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人E选择素(E-Selectin)水平。用纯化的人E选择素(E-Selectin)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入E选择素(E-Selectin),再与HRP标记的E选择素(E-Selectin)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的E选择素(E-Selectin)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人E选择素(E-Selectin)浓度。

     

    样本处理及要求:

    1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。

    2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)去除颗粒。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

    3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

    4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

    5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

    6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.

    7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

    试剂盒组成:

    1

    20倍浓缩洗涤液

    30ml×1瓶

    7

    终止液

    6ml×1瓶

    2

    酶标试剂

    6ml×1瓶

    8

    标准品(180 ng/L)

    0.5ml×1瓶

    3

    酶标包被板

    12孔×8条

    9

    标准品稀释液

    1.5ml×1瓶

    4

    样品稀释液

    6ml×1瓶

    10

    说明书

    1份

    5

    显色剂A液

    6ml×1瓶

    11

    封板膜

    2张 

    6

    显色剂B液

    6ml×1/瓶

    12

    密封袋

    1个

    注意事项:

    1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

    2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

    3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

    4.  请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔OD值的),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

    5.  严格按说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

    6.本试剂不同批号组分不得混用。

    7.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

    8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

    9.底物请避光保存。

    安全性:
    1. 避免直接接触终止液和底物。如不小心接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
    2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
    3. 不要用嘴接触试剂盒里的任何成份。

     Elisa试剂盒请远离儿童

    自备物品:

    1 、 37 ℃ 恒温箱

    2 、 标准规格酶标仪

    3 、 精密移液器及一次性吸头

    4 、 蒸馏水

    5 、 一次性试管

    6 、 吸水纸

     

    保存条件及有效期:

    1.试剂盒保存:;2-8℃。

    2.有效期:6个月

     

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