上海研鑫生物科技有限公司

小鼠基质金属蛋白酶1(MMP-1)ELISA kit

小鼠基质金属蛋白酶1(MMP-1)ELISA kit

参考价格:¥1200.00
品  牌:美国
产品型号:YX8668 (48T/96T)
所在地区:华东 上海
留言咨询
与企业取得联系时请告知该信息获取自中国教育装备采购网
我要分享
详细说明
小鼠基质金属蛋白酶1(MMP-1)ELISA kit

 ELISA试验时,注意事项如下:
  1.正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。
  2.在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
  (1)固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
  (2)包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
  (3)酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
  (4)酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入
  试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存
  说明书 1份 1份
  封板膜 2片(48) 2片(96)
  密封袋 1个 1个
  酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
  标准品:13.5U/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存
  标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存
  酶标试剂 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
  样品稀释液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
  显色剂A液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
  显色剂B液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
  终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
  20倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 30ml×1瓶 2-8℃保存
  样本处理及要求:
  1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
  2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
  3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
  4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
  5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
  6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
  7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
  
 上海研鑫生物科技有限公司专业提供科研类ELISA试剂盒,是多家科研机构和高校指定ELISA试剂盒供应商,品种齐全,价格优惠。订货热线:021一60526042 网址:www.shyxsw.net