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人糖缺失性转铁蛋白(CDT)ELISA试剂盒

人糖缺失性转铁蛋白(CDT)ELISA试剂盒

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品  牌:RD
产品型号:fk1114Y (48T/96T)
所在地区:华东 上海
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详细说明
 

〖产品名称〗

人糖缺失性转铁蛋白(CDT)ELISA试剂盒

〖英文名称〗

Human carbohydrate-deficient transferrin,CDT ELISA Kit

〖产品规格〗

96T/48T

〖保存条件〗

2-8℃(经常使用时在冰箱中保鲜即可)

〖产品用途〗

仅供科研实验

〖产品有效期〗

6个月

人糖缺失性转铁蛋白(CDT)ELISA试剂盒标本收集:

1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。

2.血浆:抗凝剂推荐使用EDTA,标本采集后30分钟内于 1000×g离心15分钟,取上清即可检测。避免使用溶血,高血脂标本。

3. 其它生物标本:1000×g离心20分钟,取上清即可检测

4. 标本应清澈透明,悬浮物应离心去除。

5.标本收集后若不及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃/-80℃电冰箱内,避免反复冻融,1-6月内检测,4℃保存的应在1周内进行检测。

6. 如果您的样本中检测物浓度高于标准品最高值,请根据实际情况,做适当倍数稀释(建议先做预实验,以确定稀释倍数)。

温育是ELISA测定中影响测定成败最为关键的一个因素。ELISA作为一种固相免疫测定,抗原抗体的结合反应在固相上进行,要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合,必须在一定的温度条件下反应一定的时间。温育所需时间与温度成反比,即温度越高,则所需时间相对较短。最为常用的温育温度有37℃和室温,其次是43℃和2~8℃。
温育这一步是临床ELISA测定中最容易出现问题的步骤。通常目前国内ELISA商品试剂盒的反应温育时间为37℃ 30分钟~1小时,elisa试剂盒则通常为37℃ 1~2小时才能有较完全的结合,低于1小时,可能会影响测定下限。因此,关于温育,在实际测定操作中一定要注意以下几点:
(1)要保证在设定的温度下有足够的反应时间。一般来说,加完样本和/或反应试剂后,将微孔板从室温拿至水浴箱或温箱中时,孔内温度从室温升至37℃,需要一定的时间,尤其是在室温比较低以及非水浴的状态下,这段升温时间可能还比较长,而在临床实验室中,很少有人注意这个问题,通常是将微孔板一放入温箱即开始计时,这样就很容易造成实际测定中温育时间不够,弱阳性样本测不出来的问题。曾有一地处南方的血站同行提出了一个问题,就是在每一年的冬季总有那么一个多月的时间,在做HBsAg测定的室内质控中,测定由卫生部临床检验中心供应的1 ng/ml弱阳性样本时,总是测不出来,不知原因为何?这可能就与南方冬天室内温度较低有关,此时微孔板转入温箱后37℃温育时间不够,以致弱阳性样本测定为阴性。因此,为保证37℃下足够的温育时间,临床实验室可自行确定本实验室不同季节(不同室温下)微孔板从室温拿至温箱后需要多长时间孔内温度才能达到37℃,从而适当延长板条在温箱中的放置时间。具体的做法是,用一小温度计放置板孔反应溶液中测量观察即可。

(2)温育温度的选择。在人糖缺失性转铁蛋白(CDT)ELISA试剂盒等elisa试剂盒的说明书中,指出温育温度可有两种,例如,一种是37℃下1小时,另一种则为43℃下45分钟。从免疫测定的抗原抗体反应的本质来看,在较低的温度下反应较长的时间最为完全。如2~8℃下反应24小时。较高的反应温度,由于分子运动的加怜惜,反应时间缩短,这一点对分子含量较多的强阳性样本的测定没有问题,但对分子含量少的弱阳性样本则有漏检的可能。因此,我们建议在临床ELISA测定中尽量使用较低温育温度较长反应时间的条件。人糖缺失性转铁蛋白(CDT)ELISA试剂盒