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人泛素分解酶(DUB)ELISA试剂盒

人泛素分解酶(DUB)ELISA试剂盒

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品  牌:RD
产品型号:fk1476Y (48T/96T)
所在地区:上海
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详细说明

  

 人泛素分解酶(DUB)ELISA试剂盒实验原理:

用纯化的MT抗体包被微孔板,制成固相载体,往微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的MT抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物(TMB)显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的MT呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

产品规格:48T/96T

产品英文: Human deubiquitinating enzyme,DUB ELISA Kit

产品用途:仅供科研使用

检测范围:15.6 pg/ml - 1,000 pg/ml

特 异 性:本试剂盒可同时检测重组或天然的,且与其它相关蛋白无交叉反应

 人泛素分解酶(DUB)ELISA试剂盒操作步骤:

实验开始前,各试剂均应平衡至室温,试剂不能直接在37 溶解;试剂或样品配制时,均需充分混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。

1、 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液 100 ,余孔分别加标准品或待测样品100 ,注意不要有气泡,加样 时将样品加于酶标板底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37 温育2小时。为保证实验结果有效

性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2、 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100 (临用前配制),酶标板加上覆膜,37 温育1小时。

3、 弃去孔内液体,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分钟,大约400 /每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

4、 每孔加检测溶液B工作液(临用前配制)100 ,加上覆膜,37 温育1小时。

5、 弃去孔内液体,甩干,洗板5次,方法同步骤3。

6、 每孔加底物溶液90 ,酶标板加上覆膜37 避光显色(反应时间控制在15-30分钟,当标准孔的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显时,即可终止)。

7、 每孔加终止溶液50 ,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物 液的加入顺序相同。

8、 立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度(OD值)。

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