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 人绿脓杆菌外毒素A(PEA)ELISA试剂盒
  • 人绿脓杆菌外毒素A(PEA)ELISA试剂盒
  • 人绿脓杆菌外毒素A(PEA)ELISA试剂盒

    参考价格: ¥1500.00
    品  牌:RB(Rapidbio)
    产品型号:48T/96T
    所在地区:上海
    上架时间:2014年03月11日
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    详细说明

    人绿脓杆菌外毒素A(PEA)ELISA试剂盒操作步骤

    1.  标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔 10 孔,在第一、第二孔中分别加标

    准品 100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二

    孔中各取 100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液 50μl,

    混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取 50μl弃掉,再各取 50μl分别加到第五、第六孔

    中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液 50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各

    取 50μl 分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液 50μl,混

    匀后从第七、第八孔中分别取 50μl 加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准

    品稀释液 50μl,混匀后从第九第十孔中各取 50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为 50μl,

    浓度分别为 150 pg/mL,100 pg/mL ,50 pg/mL,25pg/mL,12.5 pg/mL)。

    2.  加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样

    品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl(样

    品最终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混

    匀。

    3.  温育:用封板膜封板后置37℃温育 30 分钟。

    4.  配液:将 30(48T的 20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的 20倍)倍稀释后备用。 

    5.  洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此

    重复 5次,拍干。

    6.  加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

    7.  温育:操作同 3。

    8.  洗涤:操作同 5。

    9.  显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色

    15 分钟.  

    10.  终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

    11.  测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止

    液后 15 分钟以内进行。

    注意事项:

    新鲜标本尽早检测,对收集后当天就进行检测的标本,及时储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,请造模取材后,将标本及时分装后放在-20℃或-80℃条件下保存。因冰室与室温存在一定温差,蛋白极易降解,直接影响实验质量,所以避免反复冻融。

    安全性:

    1. 避免直接接触终止液和底物。如不小心接触到这些液体,请尽快用水冲洗。

    2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

    3. 不要用嘴接触试剂盒里的任何成份。

    4 Elisa试剂盒请远离儿童

    自备物品:

    1 、 37 ℃ 恒温箱2 、 标准规格酶标仪3 、 精密移液器及一次性吸头4 、 蒸馏水

    5 、 一次性试管6 、 吸水纸

    人绿脓杆菌外毒素A(PEA)ELISA试剂盒同系列产品展示:

     假单胞菌琼脂培养基 F基础 
    Pseudomonas Agar Medium for Detection of 
    fluorescin Base 
    假单胞菌琼脂培养基 P 基础 
    Pseudomonas Agar Medium for Detection of 
    Pyocyanin Base 
    假单胞菌分离琼脂 
    Pseudomonas Isolation Agar 
    NAC 琼脂培养基 
    Nalidixic Acid Cetrimide Agar Medium 
    NAC 液体培养基 
    Nalidixic Acid Cetrimide Broth Medium 
    洋葱假单胞菌琼脂基础(PC) 
    Pseudomonas Cepacia Agar Base