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  • 人免疫球蛋白G1(IgG1)ELISA试剂盒

    参考价格: ¥1480.00
    品  牌:RB(Rapidbio)
    产品型号:48T/96T
    所在地区:上海
    上架时间:2014年11月21日
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    详细说明
    原产品:人免疫球蛋白G1(IgG1)ELISA试剂盒



    人免疫球蛋白G1(IgG1)ELISA试剂盒使用目的:

         为定量(性)测定活化的目标浓度的血清,血浆,组织匀浆,细胞培养上清及其他生物液体,仅用于科研,不得用于医学诊断。

    实验原理

    试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被目标物抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标物呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

    人免疫球蛋白G1(IgG1)ELISA试剂盒组成

    名称 96孔配置 48孔配置 备注 

    微孔酶标板 12孔×8条 12孔×4条 无 

    标准品 0.5mL*6管 0.5mL*6管 按说明书复溶 

    样本稀释液 10mL 10mL 无 

    检测抗体-HRP 10mL 5mL 无 

    20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书稀释 

    底物A 6mL 3mL 无 

    底物B 6mL 3mL 无 

    终止液 6mL 3mL 无 

    封板膜 2张 2张 无 

    说明书 1份 1份 无 

    自封袋 1个 1个 无 

    人免疫球蛋白G1(IgG1)ELISA试剂盒样本处理及要求

    1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于2000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

    2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8℃ 2000g离心30分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融

    3. 细胞培养物上清或其它生物标本:2000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

    注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。

    需要而未提供的试剂和器材

    1. 酶标仪(450nm)

    2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

    3. 37℃恒温箱

    4. 蒸馏水或去离子水

    人免疫球蛋白G1(IgG1)ELISA试剂盒注意事项

    1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。

    2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。

    3. 消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。

    4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。

    5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。

    6. 在储存和温育时避免强光直接照射。

    7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

    8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。

    9. 不能使用过期产品。

    10. 如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。

    试剂准备

    试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。

    1. 标准品复溶:试剂盒提供6管标准品,每管已标定浓度,并且冻干。实验前在每个标准品管中加入0.5mL样本稀释液,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动助其溶解,使其恢复为每个标准品管身标注的浓度。

    2. 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

    人免疫球蛋白G1(IgG1)ELISA试剂盒操作步骤

    1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

    2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

    3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。

    4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

    5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4-5次(也可用洗板机洗板)。

    6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

    7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

    实验结果计算

    以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值

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