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  • 【精品】人磷酸化乙酰辅酶A(PaCoA)ELISA试剂盒

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    上架时间:2015年04月08日
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    详细说明

    人磷酸化乙酰辅酶A(PaCoA)ELISA试剂盒操作步骤:

    1.         编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)

    2.         加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液50μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,

    3.         温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

    4.         配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液加蒸馏水至600ml后备用

    5.         洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

    6.         加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

    7.         温育:操作同3。

    8.         洗涤:操作同5。

    9.         显色:每孔先加入显色剂A 50μl,再加入显色剂B 50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟

    10.     终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

    11.     测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

    人磷酸化乙酰辅酶A(PaCoA)ELISA试剂盒注意事项

    1.操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。

    2.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

    3.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

    4.  封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

    5.底物请避光保存。

    6.试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,参考波长为630nm

    7.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M的硫酸,使用时必须注意安全。

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