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猪内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒

猪内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒

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品  牌:美国BD
产品型号:HE5251 (48T/96T)
适用范围:高教
所在地区:华北 天津
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详细说明

猪内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒


我公司的相关试剂盒的各种指标齐全涉及范围或分类广泛,具体如下:

人,小,鼠,大鼠,豚鼠,猪,狗,牛,羊,猴,兔,等动物种属

试剂的准备
1. 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:
40 IU/L (6号标准品) 原倍浓度不用稀释直接加入50ul。
20 IU/L (5号标准品) 100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液
10 IU/L (4号标准品) 100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液
5.0 IU/L (3号标准品) 100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液
2.5 IU/L (2号标准品) 100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液
1.25 IU/L (1号标准品) 100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液
0 IU/L (空白对照) 原始浓度不用稀释直接加入50ul。

2. 洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。

猪内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒操作步骤
1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。

建议使用的实验方案
 标准品浓度(IU/L) 
A 40 40 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
B 20 20 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
C 10 10 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
D 5.0 5.0 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
E 2.5 2.5 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
F 1.25 1.25 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
G 0 0 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
H 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品


局限
6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。

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