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 大鼠17羟孕酮(17-OHP)ELISA试剂盒
  • 大鼠17羟孕酮(17-OHP)ELISA试剂盒
  • 大鼠17羟孕酮(17-OHP)ELISA试剂盒

    参考价格: ¥1680.00
    品  牌:ELISA试剂盒
    产品型号:48T/96T
    所在地区:上海
    上架时间:2013年03月15日
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    详细说明

    W. 用ELISA 法夹心法测人血清中IL-1,IL-6,CRP,TNF, ,请问:
    1.预实验时,标准品的浓度怎样确定?梯度做几个,需要做空白孔吗?复孔要做吗?
    2.样本的梯度作几个?稀释倍数确定的依据时什么?
    3.我测的样本中TNF 量很低,国外有人用高敏试剂盒,国内有用化学发光法,您知
    道有没有更经济的方法?
    标准品最好做复孔,特别在试验初期,如果 显色剂很稳定的话,空白孔可做可不作。在自己试验时标准品浓度可以不用太多,三个(高中低)即可。你样本中TNF 的量低到什么程度,一般好的ELISA可以测到ng 级别,再小的话就不行了。化学发光法以及比较经济了,你还可以试试生物素亲和素放大的酶免法,可以提高很多灵敏度的。
    W. 双抗夹心法中,最后TMB 用硫酸终止,测量OD450 的时候是用单波长450nm 还是
    双波长测量?如果是后者,参考波长是哪个?630nm 可以吗?
    如果有条件的话,就用双波长 450,630
    如果没有,单波长也可以。
    大鼠17羟孕酮(17-OHP)ELISA试剂盒
    品牌:R&D AMERICAN
    货号: GO-Y12846
    规格:1 x 96 ; 96 tests/Kit
    原价:3600元
    促销价:询价
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    W. 阴性阳性血清都是从1:50 开始被比稀释,到1:25600,阳性OD 值都在1.0
    以上,1.7 以下。阴性值在0.3 以下。0.2 的不多,多数在0.1 及其以下。 血清效价这么高,但是怎么OD 值到不了别人说的2 或者3 呢?
    如果 1:50 OD 是1.7, 到了1:25600,OD 还有1.0 以上的话,这个结果
    或者你的系统有问题。
    W. 1、用pH9.6,0.05M 的碳酸盐稀释抗原C1q,10ug/mL,5ug/mL,2.5ug/mL
    100uL/孔,4 度过夜,PBST 洗板三次
    2、用10%的小牛血清(pH7.2 的PBS),200uL/孔,37 度3h,PBST 洗板三次
    3、加入阴阳性血清100uL/孔,37 度,2h,PBST 洗板五次
    4、 PBST(含1%的小牛血清)稀释酶标记的羊抗人IgG1:10000,1:20000,
    1:40000,100uL/孔 ,37 度,半小时
    结果: 10ug/mL 5ug/mL 2.5ug/mL
    1:10000 + 0.983 0.740 0.714
    1:10000 - 0.577 0.676 0.576
    1:10000 空白 0.180 0.134 0.097
    1:20000 + 0.508 0.506 0.367
    1:20000 - 0.333 0.385 0.313
    1:20000 空白 0.085 0.094 0.078
    1:40000 + 0.331 0.379 0.229
    1:40000 - 0.233 0.303 0.261
    1:40000 空白0.061 0.068 0.06
    该怎么选择包被浓度,酶的浓度以及封闭的
    条件如何?
    1)在包被过程和封闭以后,洗1 次就可以了
    2)你这个结果说明你的酶标抗体和包被的反应板有一些非特异性吸附,建议你
    将封闭换成1%的BSA 或者5%的脱脂奶粉,在酶标抗体的稀释液中将小牛血清
    的浓度增加到20%。
    3)间接法的话,血清需要稀释,你的阴性、阳性血清稀释了吗,如果没有的话,
    建议1:10 到1:100,不同的稀释度你试试。如果你本来没有,要稀释后再做
    的话,根据你目前的结果,估计你要提高包被浓度或者酶标抗体浓度。

    生物特性

    物种

    大鼠17羟孕酮(17-OHP)ELISA试剂盒

    方法

    ELISA

    指标

    17-OHP

    检测范围

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    样品类型

     Plasma

    保存

    短期4℃/长期-20℃保存 

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