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 植物血凝素(PHA )ELISA试剂盒
  • 植物血凝素(PHA )ELISA试剂盒
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    参考价格: ¥0.00
    品  牌:ELISA试剂盒
    产品型号:48T/96T
    所在地区:上海
    上架时间:2013年03月15日
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    植物血凝素(PHA )ELISA试剂盒W. 用ELISA 法夹心法测人血清中IL-1,IL-6,CRP,TNF, ,请问:
    1.预实验时,标准品的浓度怎样确定?梯度做几个,需要做空白孔吗?复孔要做吗?
    2.样本的梯度作几个?稀释倍数确定的依据时什么?
    3.我测的样本中TNF 量很低,国外有人用高敏试剂盒,国内有用化学发光法,您知
    道有没有更经济的方法?
    标准品最好做复孔,特别在试验初期,如果 显色剂很稳定的话,空白孔可做可不作。在自己试验时标准品浓度可以不用太多,三个(高中低)即可。你样本中TNF 的量低到什么程度,一般好的ELISA可以测到ng 级别,再小的话就不行了。化学发光法以及比较经济了,你还可以试试生物素亲和素放大的酶免法,可以提高植物血凝素(PHA )ELISA试剂盒W. 双抗夹心法中,最后TMB 用硫酸终止,测量OD450 的时候是用单波长450nm 还是
    双波长测量?如果是后者,参考波长是哪个?630nm 可以吗?
    如果有条件的话,就用双波长 450,630
    如果没有,单波长也可以。
    (1)用包被液(CBS)稀释包被抗原,10μg/ml。
    (2)将加有抗原的包被液加入各孔,100μl/孔。
    (3)4℃ 16-18h.
    (4)甩去包被液,洗板三次,拍干,加入PBST+1%BSA 封闭液,200μl/孔。
    (5)室温封闭1h。
    弃去封闭液,洗板三次,拍干。
    (7)将包被板条真空抽干并于真空箱内保存1h。
    检测程序:
    1.标本室温温育30 分钟,洗涤3 次。
    2.加酶标抗体室温温育30 分钟,洗涤5 次。
    3.加显色液,室温温育30 分钟,终止读数。
    血清稀释液配方:PBST+1%BSA
    酶标抗体稀释液配方为购买
    用CB 包被,不加NaCl,在板制备过程中洗涤只用1 次即可。
    血清稀释浓度调整没有意义,必定是同升同降,你应该试试将包被浓度和酶标抗
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