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阿维菌素

阿维菌素

参考价格:¥800.00
所在地区:华东 上海
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详细说明

 阿维菌素
用纯化的抗体被微孔板,制成固相载体,往包被抗体LEP抗体的微孔中依次加入标准品、生物素化的抗LEP抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,关在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色在深浅和样品中的LEP呈正相关。用酶标仪在450mm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度
 阿维菌素 操作步骤
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100µl,余孔分别加标准品标准品标准品标准品或待测样品100µl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性为保证实验结果有效性为保证实验结果有效性为保证实验结果有效性,,,,每次实验请使用新的标准品每次实验请使用新的标准品每次实验请使用新的标准品每次实验请使用新的标准品溶液溶液溶液溶液。
2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液检测溶液检测溶液检测溶液A工作液工作液工作液工作液 100µl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400µl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4.每孔加检测溶液检测溶液检测溶液检测溶液B工作液工作液工作液工作液(同检测同检测同检测同检测A工作液工作液工作液工作液) 100µl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350µl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6.依序每孔加底物溶液底物溶液底物溶液底物溶液90µl,酶标板加上覆膜37℃避光显色避光显色避光显色避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)
7.依序每孔加终止溶液终止溶液终止溶液终止溶液50µl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后立即进行检测
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