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 FaDu(人咽鳞癌细胞)
  • FaDu(人咽鳞癌细胞)
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    参考价格: ¥0.00
    所在地区:上海
    上架时间:2013年04月13日
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    FaDu(人咽鳞癌细胞)  原代细胞培养【注意事项】
    1.自取材开始,保持所有组织细胞处于无菌条件。细胞计数可在有菌环境中进行。
    2.在超净台中,组织细胞、培养液等不能暴露过久,以免溶液蒸发。
    3.凡在超净台外操作的步骤,各器皿需用盖子或橡皮塞,以防止细菌落入。
    4.操作前要洗手,进入超净工作台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦试。FaDu(人咽鳞癌细胞)
    5.点燃酒精灯,操作在火焰附近进行,耐热物品要经常在火焰上烧灼,金属器械烧灼时间不能太长,以免退火,并冷却后才能夹取组织,吸取过营养液的用具不能再烧灼,以免烧焦形成碳膜。
    6.操作动作要准确敏捷,但又不能太快,以防空气流动,增加污染机会。
    7.不能用手触已消毒器皿的工作部分,工作台面上用品要布局合理。
    8.瓶子开口后要尽量保持45°斜位。
    9.吸溶液的吸管等不能混用。
    原代培养:
    1.取出小鼠后沥干酒精,放入超净台内,固定在泡沫板上。
    2.用镊子提起皮肤,用解剖剪剪开皮肤一个横切口,将皮肤向上撕开,然后剪开肌肉等,暴露出腹腔,在左侧找到脾脏,用弯头眼科镊取出脾脏,置于无菌培养皿中。
    3.用生理盐水将取出的脾脏清洗多次,并剔除多余无用的组织。
    4.将筛网置于平皿中,脾脏置于筛网上,用弯头镊镊住,轻轻在筛网上进行碾磨,同时不停滴加不含血清的培养液冲洗。
    5.将碾磨好的细胞悬液吸入至离心管中,离心(1000rpm,5min),吸去上清(去除血液等)。
    6.加入10ml培养液,吹打混匀,取样计数。
    7.将稀释好的细胞悬液分装于培养瓶中,轻轻摇晃混匀,在培养瓶上。
    面做好标志,注明细胞、组别及日期。然后将培养瓶置于二氧化碳培养箱中培养。
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