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兔抗人、大鼠、小鼠VEGF

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兔抗人、大鼠、小鼠VEGF上海谷研科技有限公司推荐的产品: 
肿瘤坏死因子相关激活诱导因子(TRANCE)ELISA
生长激素释放因子(GH-RF)ELISA
巨噬细胞趋化因子(MCF)ELISA
α/β干扰素受体(IFN-α/βR)ELISA
B细胞生长因子(BCGF)ELISA
B细胞分化因子(BCDF)ELISA
兔抗人、大鼠、小鼠VEGF上皮细胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA
可溶性粘附分子(Sam)ELISA
巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)ELISA
可溶性血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA
胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)ELISA
穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA
多效生长因子(PTN)ELISA
可溶性CD28(sCD28)ELISA
淋巴细胞因子ELISA
胸腺活化调节趋化因子(TARC/CCL17)ELISA
神经细胞粘附分子配体1(NCAM-L1/CD171)ELISA
神经保护因子(CVNPF)ELISA
可溶性肿瘤坏死因子α受体(sTNFαR)ELISA
可溶性细胞因子受体(sCKR)ELISA
可溶性凋亡相关因子配体(sFASL)ELISA
细胞凋亡抑制因子(IAP)ELISA
集落刺激因子(CSF)ELISA
γ干扰素诱导单核细胞因子(MIGF/CXCL9)ELISA
干扰素诱导T细胞趋化因子(ITAC/CXCL11)ELISA
  注意事项:
western blot中转移在膜上的蛋白处于变性状态,空间结构改变,因此那些识别空间表位的抗体不能用于western blot检测。这种情况可以将表达目的蛋白的细胞或细胞裂解液中的所有蛋白先生物素化,再用酶标记亲和素进行western blot。实验中取胶和膜需带手套。
兔抗人、大鼠、小鼠VEGF实验步骤:
1. 组织块称重
2. 利用液氮、研钵粉碎组织块
3. 加入RIPA缓冲液(每克组织3 ml RIPA),PMSF(每克组织30μl,10 mg/ml PMSF),利用Polytron进一步匀浆(15,000转/分*1分钟)维持4℃
4. 加入PMSF(每克组织30μl,10 mg/ml PMSF),冰上孵育30分钟5. 移入离
心管4℃ 约20,000 g(约15,000转)15分钟
6. 上清液为细胞裂解液可分装-20℃保存
7. 进行Bradford比色法测定蛋白质浓度
8. 取相同质量的细胞裂解液(体积*蛋白质浓度),并加等体积的2×电泳加样缓冲液
9. 沸水浴中3分钟
10. 上样
11. 电泳(浓缩胶20mA,分离胶35mA)
12. 电转膜仪转膜(100mA 40分钟)
13. 膜用丽春红染色,胶用考马斯亮蓝染色
14. Westernblot 试剂盒显色
15. 分析比较记录