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SABC(大鼠IgG)-POD浓缩型SABC试剂盒

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SABC(大鼠IgG)-POD浓缩型SABC试剂盒上海谷研科技有限公司推荐的产品: 
神经调节蛋白1(NRG-1)ELISA
心钠肽(ANP)ELISA
多巴胺D2受体(D2R)ELISA
内吗啡肽-2(EM-2)ELISA
α-内吗啡肽(α-EP)ELISA
抑制素(INH)ELISASABC(大鼠IgG)-POD浓缩型SABC试剂盒
神经元凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA
食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA
促睡眠肽(DSIP)ELISA
6-羟多巴胺(6-OHDA)ELISA
心纳素(ANF)ELISA
神经髓鞘蛋白(p2)ELISA
精氨酸加压素(AVP)ELISA
垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)ELISA
微管相关蛋白2(MAP-2)ELISA
神经丝蛋白(NF)ELISA
利钾尿肽(KP)ELISA
神经降压素(NT)ELISA
神经激肽B(NKB)ELISA
强啡肽(Dyn)ELISA
脑啡肽(ENK)ELISA
γ肽(Pγ)ELISA
C型钠尿肽(CNP)ELISA
阿立新A(Orexin A)ELISA
神经肽Y(NP-Y)ELISA
脑肠肽(BGP/Gehrelin)ELISA
  注意事项:
western blot中转移在膜上的蛋白处于变性状态,空间结构改变,因此那些识别空间表位的抗体不能用于western blot检测。这种情况可以将表达目的蛋白的细胞或细胞裂解液中的所有蛋白先生物素化,再用酶标记亲和素进行western blot。实验中取胶和膜需带手套。
SABC(大鼠IgG)-POD浓缩型SABC试剂盒实验步骤:
1. 组织块称重
2. 利用液氮、研钵粉碎组织块
3. 加入RIPA缓冲液(每克组织3 ml RIPA),PMSF(每克组织30μl,10 mg/ml PMSF),利用Polytron进一步匀浆(15,000转/分*1分钟)维持4℃
4. 加入PMSF(每克组织30μl,10 mg/ml PMSF),冰上孵育30分钟5. 移入离
心管4℃ 约20,000 g(约15,000转)15分钟
6. 上清液为细胞裂解液可分装-20℃保存
7. 进行Bradford比色法测定蛋白质浓度
8. 取相同质量的细胞裂解液(体积*蛋白质浓度),并加等体积的2×电泳加样缓冲液
9. 沸水浴中3分钟
10. 上样
11. 电泳(浓缩胶20mA,分离胶35mA)
12. 电转膜仪转膜(100mA 40分钟)
13. 膜用丽春红染色,胶用考马斯亮蓝染色
14. Westernblot 试剂盒显色
15. 分析比较记录