上海谷研实业有限公司

 SABC(兔IgG)-POD浓缩型SABC试剂盒
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    参考价格: ¥0.00
    所在地区:上海
    上架时间:2013年05月03日
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    SABC(兔IgG)-POD浓缩型SABC试剂盒上海谷研科技有限公司推荐的产品: 
    抗神经元核抗体1型/抗Hu抗体(ANNA-1/Hu)ELISA
    抗DNA酶B抗体(anti-DNase B)ELISA
    抗BP180抗体(BP180-Ab)ELISA
    抗BB抗体(BB-Ab)ELISA
    抗平滑肌抗体(ASMA)ELISA
    抗肝细胞膜抗体(LMA)ELISA SABC(兔IgG)-POD浓缩型SABC试剂盒
    抗肝特异性脂蛋白抗体(LSP)ELISA
    抗眼肌抗体(EMAb)ELISA
    抗补体1q抗体(C1q)ELISA
    抗内因子抗体(IFA)ELISA
    抗磷脂抗体(Apl/APA)ELISA
    抗组蛋白抗体(AHA)ELISA
    晶体蛋白α(Cryα)ELISA
    晶体蛋白β(Cryβ)ELISA
    抗胶原蛋白抗体(CLA)ELISA
    抗角蛋白丝聚集素/丝集蛋白抗体(AFA)ELISA
    抗环胍氨酸肽抗体(CCP)ELISA
    抗核周因子抗体(APF)ELISA
    抗核抗体(ANA)ELISA
    抗肝肾微粒体抗体(LKM)ELISA
    抗α干扰素抗体(IFNα-Ab)ELISA
    抗Sc1-70抗体(Sc1-70-Ab)ELISA
    Jo1抗体/抗组氨酰tRNA合成酶抗体(Jo1/HRS)ELISA
      注意事项:
    western blot中转移在膜上的蛋白处于变性状态,空间结构改变,因此那些识别空间表位的抗体不能用于western blot检测。这种情况可以将表达目的蛋白的细胞或细胞裂解液中的所有蛋白先生物素化,再用酶标记亲和素进行western blot。实验中取胶和膜需带手套。
     SABC(兔IgG)-POD浓缩型SABC试剂盒实验步骤:
    1. 组织块称重
    2. 利用液氮、研钵粉碎组织块
    3. 加入RIPA缓冲液(每克组织3 ml RIPA),PMSF(每克组织30μl,10 mg/ml PMSF),利用Polytron进一步匀浆(15,000转/分*1分钟)维持4℃
    4. 加入PMSF(每克组织30μl,10 mg/ml PMSF),冰上孵育30分钟5. 移入离
    心管4℃ 约20,000 g(约15,000转)15分钟
    6. 上清液为细胞裂解液可分装-20℃保存
    7. 进行Bradford比色法测定蛋白质浓度
    8. 取相同质量的细胞裂解液(体积*蛋白质浓度),并加等体积的2×电泳加样缓冲液
    9. 沸水浴中3分钟
    10. 上样
    11. 电泳(浓缩胶20mA,分离胶35mA)
    12. 电转膜仪转膜(100mA 40分钟)
    13. 膜用丽春红染色,胶用考马斯亮蓝染色
    14. Westernblot 试剂盒显色
    15. 分析比较记录