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 末端转移酶/末端脱氧核苷酸转移酶/TDT
  • 末端转移酶/末端脱氧核苷酸转移酶/TDT
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    适用范围:全领域
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    上架时间:2015年06月29日
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    M0095 末端转移酶/末端脱氧核苷酸转移酶/TDT BR,20u/ul 500U 9027-67-2
          2500U  

    英文名称:TDT;Terminal Transferase;Terminal Deoxynucleotidyl Transferase
    其他名称:末端脱氧核苷酸转移酶

    CAS号:9027-67-2
    分子量:60000

    级别:BR
    来源:大肠杆菌细胞,含有编码牛胸腺末端脱氧核苷转移酶的基因
    浓度:20u/ul
    活性定义:是指在37℃、60分钟内将1nmol脱氧核糖核酸掺入多聚核苷酸片段(吸附在DE-81上)所需的酶量
    酶活性分析混合物:66mM二甲胂酸钾(PH7.2),1mM CoCL2, 0.01%(v/v) Triton X-100, 10uM oligo(dT)10, 1mM dTTP和0.4MBq/ml[3h]-dTTP
    保存液组分:100mM 醋酸钾(PH6.8)、2mM β-巯基乙醇,0.01%(v/v) Triton X-100和50%(v/v)甘油
    5×反应缓冲液:1M 二甲胂酸钾、125mM Tris,0.05%(v/v) Triton X-100,5mM CoCL2(PH7.2,25℃)
    抑制剂:金属螯合剂、铵、氯化物、碘化物和磷酸盐离子
    失活:加入EDTA,70℃加热10分钟
    质量保证:测试表明无内切和外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染
    注意:由于含有CoCL2,TdT反应缓冲液不能与下游应用兼容,需采用柱离心法或苯酚/氯仿抽提及乙醇沉淀方法纯化反应混合物,除去CoCL2
    性状:悬浮液,重组酶。末端转移酶(Terminal transferase, TdT)是一种无需模板的DNA聚合酶,催化脱氧核苷酸结合到DNA分子的3羟基端。带有突出、凹陷或平滑末端的单双链DNA分子均可作为TdT的底物。一般操作是:先在载体上打开一单个位点,把它与末端转移酶和某一dNTP(如dATP)一起保温以使添尾,另一待插入的外源DNA片段则用互补的用同法添dNTP(dTTP)用同法添尾。接着使上述两种都接上互补单链尾的DNA片段彼此退火,使形成一杂合载体来转化受体菌。杂合载体中的裂隙或切口可被受全菌所修复。
    用途:生化研究。催化DNA的3末端添加同聚物;DNA的3末端标记
    保存:-20°C