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 犬白细胞分化抗原8ELISA Kit价格/CD8 ELISA试剂盒说明书
  • 犬白细胞分化抗原8ELISA Kit价格/CD8 ELISA试剂盒说明书
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    上架时间:2016年05月31日
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    犬白细胞分化抗原8ELISA Kit价格/CD8 ELISA试剂盒说明书

    可通过棋盘滴定法进行测定,但用单项滴定法更为简便,其方法是将抗原进行一系列稀释包被微量反应板,再用一定稀释度的阳性参考血清和阴性参考血清进行孵育后洗涤,再加酶结合物进行反应,经孵育洗涤后,加底物溶液显色,终止反应后分别测定O.D值,选择O.D值≥1.0的那个抗原稀释度为最适包被浓度。一般总是要选择那个O.D值稍大于1.0,而不选择小于1.0的抗原浓度。阴性参考血清O.D值要求<0.1-0.2。

     

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    也就是要求阳性参考血清和阴性参考血清的O.D值有明显差别。抗原包被固相载体除浓度外,对时间、温度、PH均有关系。温度高(如37℃、45℃、或56℃),包被时间可缩短,温度低可延长包被时间。但为了方便起见,通常采用4℃包被过夜,可使抗原吸附得更加完全且均匀。在用聚苯乙烯或聚乙烯微量反应板或塑料管作固相载体时,在碱性条件下(如0.1mol/L、PH9.6碳酸盐缓冲液稀释抗原)4℃包被过夜较为合适。但在某些试验中,如用LPS或毒素蛋白包被时,用 PH 7.2-7.4 PBS稀释才是满意的。包被特异蛋白质的浓度为1-10ug/ml,而对某些病原微生物抗原以5-20ug/ml较为合适,但均应通过滴定。




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