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大鼠抗促甲状腺素受体抗体(TRAb)ELISA试剂盒

大鼠抗促甲状腺素受体抗体(TRAb)ELISA试剂盒

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品  牌:进口 国产
产品型号:48T/96T
所在地区:北京
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详细说明
大鼠抗促甲状腺素受体抗体(TRAb)ELISA试剂盒

应用范围:科研用检测试剂

样品形式:血清/血浆/组织/细胞培养上清/其它生物液体等(具体情况请来电咨询)

保存与运输:短期4℃/长期-20℃保存


白介素2(IL-2)
的诱生为例:

  IL-2主要由活化的CD4+细胞产生,通过自分泌和旁分泌作用于分泌IL-2的细胞本身或邻近的CD4+和CD8+细胞,是机体免疫网络中最重要的调节因子。因此,IL-2活性的检测已成为评价机体免疫功能的重要指标之一。但体液中IL-2含量甚少,难以直接测定。通常检测PHA和ConA等丝裂原诱导单个核细胞在体外产生IL-2的能力来反映。

    体外诱生和制备IL-2可用正常组织细胞(如人脾脏、扁桃体、淋巴结)及外周血单个核细胞,大鼠和小鼠脾脏细胞,各种传代细胞系(如人白血病Jurkat细胞系,小鼠胸腺瘤EL-4细胞系,长臂猿淋巴肉瘤MLA-144细胞系等)和一些T细胞杂交瘤。

    1.人外周血单个核细胞诱生IL-2

    (1)无菌取静脉血5mL,肝素抗凝。用淋巴细胞分层液密度梯度离心(2 000r/min×30min),分离单个核细胞。

    (2)用Hanks液洗涤细胞2次,然后用含10%NBS的RPMI-1640完全培养液调整细胞浓度为1×106/mL。

    (3)于24孔培养板中,加入细胞悬液lmlJ孔,PHA 100pz/孔。

    (4)37℃5%C0:条件下培养48h。

    (5)吸出培养上清,2000r/rain离心20rain,收集上清,—20~C冻存待测。

    2.小鼠和大鼠脾脏细胞诱生IL-2

    (1)将小鼠拉颈致死,无菌操作取脾脏。仔细剪碎,加适量的Hanks液混悬,经100目筛网过滤,获得单个脾细胞:

    (2)低渗或0.83%氯化铵处理,裂解残余红细胞。

    (3)以含2%NBS的HBSS离心洗涤2次,用含10%NBS的RPMI-1640完全培养液配制成5×106/mL脾细胞悬液,加入ConA使最终浓度为5~10pg/mL。置37%,5%C02温箱中培养24—48h(视细胞转化情况而异)。

    (4)离心沉淀,收集上清。—20~C冻存待测。

    3.MLA-144细胞和EL-4细胞诱生ID2  MIA—144细胞可以自发分泌IL-2,按以下条件培养:起始细胞浓度为2X105/mL,终末浓度为1X106/mL,传代时间为48h:

    EL-4细胞在十四酰佛波乙酸酯(tetmdecanoylphorbolacetate,TPA)刺激下可产生高效价11,-2。TPA为10ng/mL,起始细胞浓度为106/mL,培养48h,收集上清:

    4.人白介素2受体试剂盒注意事项

    (1)诱生剂浓度、培养条件和细胞浓度对结果均有明显影响,应进行预试验以确定最佳实验条件。

(2)培养器皿和研磨条件:24孔培养板培养细胞活率较高,但生长稍慢。玻璃瓶培养有时会因玻璃质量和清洗不净引起细胞死亡,故应注意采取相应措施。大量培养时用大容量瓶比较方便,可减少操作中的污染。研磨组织可用玻璃匀浆器、不锈钢网和毛玻璃