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 猪免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒说明书
  • 猪免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒说明书
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    参考价格: ¥0.00
    适用范围:高教
    所在地区:北京
    上架时间:2014年12月02日
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    详细说明

    猪免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒说明书

     

    仪器质控

    为使仪器保持最佳工作状态,应建立维护和校正仪器的标准操作程序(SOP),所要控制的仪器包括移液器(加样枪)、温箱、洗板机和酶标仪。

    ◎移液器: ELISA加样量小(20-200μl),其准确性直接影响实验结果,利用称重法检查:低、中、高三个刻度分别吸取指示量的水,万分之一天平称重后计算吸量是否准确,一般应在±5%以内;

    ◎恒温箱: 经常检查恒温箱温度计所示的温度和水中(或温箱内)实测温度是否一致,允许有±1℃的误差;

    ◎洗板机: 每个厂家设置洗板后的残留液有各自的规定,一般不超过2μl;人工扣板时,垫纸不湿;定期检查管孔是否堵塞;

    ◎酶标仪:经常维护其光学部分,防止滤光片霉变,定期检测校正,使其保持良好的工作性能。


     

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    加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

    温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  

    配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用  

    洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。  

    加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。  

    温育:操作同3。  

    洗涤:操作同5。  

    显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.  

    终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。  

    测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。


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