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人基空肯雅IgG(CG-IgG)ELISA试剂盒

人基空肯雅IgG(CG-IgG)ELISA试剂盒

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品  牌:美国RB(Rapidbio)
所在地区:上海
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详细说明

人基空肯雅IgG(CG-IgG)ELISA试剂盒

 

操作步骤:

1.         编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)

2.         加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,

3.         温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.         配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液加蒸馏水至600ml后备用

5.         洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6.         加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7.         温育:操作同3。

8.         洗涤:操作同5。

9.         显色:每孔先加入显色剂A 50μl,再加入显色剂B 50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟

10.     终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11.     测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

 

结果判定:

试验有效性:阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10

临界值(CUT OFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15

阴性判定:样品OD值< 临界值(CUT OFF)者为免疫缺陷病(FIV)阴性

阳性判定:样品OD值≥ 临界值(CUT OFF)者为免疫缺陷病(FIV)阳性

注意事项

1.操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。

2.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

3.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

4.  封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

5.底物请避光保存。

6.试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,参考波长为630nm

7.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M的硫酸,使用时必须注意安全。

 

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