北京冬璞泰和科技有限责任公司

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 RNeasy Plus Universal Mini Kit (50)  73404 (QIAGEN)
  • RNeasy Plus Universal Mini Kit (50)  73404 (QIAGEN)
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    参考价格: ¥0.00
    品  牌:QIAGEN
    产品型号:73404
    适用范围:高教
    所在地区:
    上架时间:2018年10月15日
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  • 详细说明
    RNeasy Plus Universal Mini Kit (50)  73404 (QIAGEN)
    • 适用于所有组织溶液类型
    • 整合RNeasy和QIAzol技术,节省时间
    • 不使用酶,快速去除基因组DNA
    • RNA纯度高,适用于下游应用

    RNeasy Plus Universal Kits可快速、方便的纯化RNA,同时有效地去除基因组DNA。优化的实验方案可从各种组织类型,包括难裂解组织中纯化高品质RNA。该试剂盒含有QIAzol Lysis Reagent和RNeasy离心柱,前者用于裂解脂肪组织和其他组织类型,后者用于纯化高品质RNA。该试剂盒有两种规格:RNeasy Plus Universal Mini Kit可从至多50 mg组织中纯化RNA,RNeasy Plus Universal Midi Kit可从至多250 mg组织中纯化RNA。RNeasy Plus Universal Mini Kit可在QIAcube全自动核酸纯化仪上自动化进行纯化。

    性能

    RNeasy Plus Universal操作流程可从各种类型的组织中得到高品质RNA,重复性好,适用组织包括脂肪组织和不易裂解的组织(参见下表)。不同物种和不同发育阶段的组织的纯化产量不同,尤其是脂肪组织。

    RNeasy Plus Universal Kits纯化得到总RNA的产量
    大鼠/小鼠组织(10 mg) 总RNA产量 (μg)
    脂肪组织  0.5–2.5
    5–20
    心脏 5–25
    10–60
    5–40
    15–80
    5–15
    肌肉 5–35
    皮肤 2–5
    15–100

    使用real-time RT-PCR和QIAxcel体系分析纯化得到的RNA,表明这些RNA具有较好的完整性。

    原理

    RNeasy Plus Universal操作流程可从各种类型组织中纯化RNA,包括脂肪或不易裂解的组织。RNeasy Plus Universal Kits整合了苯酚/胍裂解技术和硅胶膜总RNA纯化技术。试剂盒中的QIAzol Lysis Reagent是一种由苯酚和硫氰酸胍组成的单相溶液,专为方便的裂解各种组织设计,并能抑制RNases的活性。高效的裂解以及通过有机抽提去除污染物,使RNeasy离心柱可用于处理更大量的组织。gDNA Eliminator溶液能有效去除基因组DNA污染,非常有助于DNA分离到中间相。

    操作流程

    RNeasy Plus Universal操作流程易于进行,与苯酚/氯仿处理后回收相比,此方法更快、更有效,能得到更高纯度和产量的RNA。RNeasy Plus Universal Mini Kit可从50 mg组织中纯化RNA;RNeasy Plus Universal Midi Kit可从250 mg组织中纯化RNA。

    可使用TissueRuptor、TissueLyser LT或TissueLyser II在QIAzol Lysis Reagent中进行样本匀浆。加入gDNA Eliminator Solution和氯仿后,匀浆离心分为水相和有机相。收集含有RNA的上层水相,加入乙醇,使用RNeasy离心柱纯化RNA。总RNA结合到离心柱膜上,苯酚和其他污染物被高效洗去。获得的高品质RNA可用RNase-free水洗脱下来。

    该实验方案适用于富集mRNA,不包括大部分小于200 nt的RNAs(如rRNAs和tRNAs)。RNeasy Plus Universal操作流程稍作修改后可从培养细胞中纯化包含miRNA等小RNAs的总RNA。

    应用

    RNeasy Plus Universal Kits纯化得到的RNA非常适用于对少量DNA敏感的下游应用,如定量real-time RT-PCR。纯化得到的RNA还可以用于其他应用。