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 QIAfilter Plasmid Kits 12281
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    参考价格: ¥0.00
    品  牌:QIAGEN
    产品型号:12281
    适用范围:高教
    所在地区:
    上架时间:2018年10月15日
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  • 详细说明
    QIAfilter Plasmid Kits 12281

     

    QIAfilter Plasmid Kits

    快速纯化至多10 mg转染级质粒或柯斯质粒DNA
     
    无需离心澄清裂解液
    减少质粒纯化时间
    高产率质粒DNA
    使用LyseBlue,获得最佳的裂解效果和最大的DNA产量

    QIAfilter Plasmid Kits基于阴离子交换技术纯化质粒DNA,细菌裂解液通过过滤来澄清。该试剂盒可纯化获得至多10 mg DNA。经纯化的DNA的纯度相当于两次CsCl梯度离心方法制备的纯度,适合转染级的应用。
     
    QIAGEN Plasmid Kit实验流程。

    将中性细菌裂解物直接置于QIAfilter Cartridge内孵育,数秒内即可过滤澄清。然后将澄清的裂解物上样至阴离子交换纯化柱内,在适当的低盐和pH条件下,质粒DNA会选择性结合上去。利用中盐浓度的洗涤液去除RNA、蛋白质、代谢物及其他低分子量杂质,使用高盐缓冲液洗脱超纯的质粒DNA。利用异丙醇沉淀对DNA进行浓缩并脱盐,并通过离心收集。

    性能

    QIAfilter Plasmid Kit配合QIAfilter过滤条通过含有阴离子树脂的QIAGEN-tip过滤法快速澄清细菌裂解液,取代离心操作。产量可达 10 mg(Giga)、2.5 mg(Mega)、500 μg(Maxi)、或100 μg(Midi)转染级纯的高拷贝质粒DNA。(培养容量取决于质粒拷贝数、插入片段大小、宿主菌株和培养基。)

    由于培养容量较大且QIAfilter Mega-Giga Cartridge自身容量有限,与QIAfilter Plasmid Giga Kits相比,QIAfilter Plasmid Mega Kits更适合纯化低拷贝质粒和柯斯质粒。

    原理

    QIAfilter、HiSpeed和EndoFree Plasmid Kits提供的QIAfilter Cartridges是特别的过滤组件,用于取代离心操作澄清碱性裂解法裂解细菌细胞得到的溶液。QIAfilter Cartridges只需使用离心所需的小部分时间,即可完全去除SDS沉淀物,澄清细菌裂解液,可节省多达1小时的时间。

    QIAfilter Mega-Giga Cartridges在低真空状态下工作,以最简单的方法高效澄清大体积的细菌裂解液。
    QIAGEN-tips内独特的阴离子交换树脂专为纯化核酸设计。它独特的分离特性,使得到的DNA的纯度相当于连续2次CsCl梯度离心得到的DNA纯度。QIAGEN-tips利用重力流原理工作,缩短了制备质粒的手动操作时间。整套QIAGEN质粒纯化体系避免使用苯酚、氯仿、溴化乙锭和CsCl等有毒物质,减小对使用者和环境的危害。

    操作流程

    中和的细菌裂解液直接放入QIAfilter Cartridge中,裂解液通过过滤澄清。澄清后的裂解物上样到阴离子交换柱,质粒DNA在适当的低盐条件和pH条件下与树脂选择性结合。RNA、蛋白质、代谢产物和和其它低分子量杂质用中盐洗涤液去除,用高盐缓冲液洗脱纯的质粒DNA(参见QIAGEN Plasmid Kit procedures)。质粒DNA用异丙醇沉淀浓缩和脱盐后,离心收集。

    应用

    QIAfilter Plasmid Kits纯化得到的质粒DNA高度适用于从克隆到转染等多种应用。