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 QIAGEN Large-Construct Kit 12462
  • QIAGEN Large-Construct Kit 12462
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    参考价格: ¥0.00
    品  牌:QIAGEN
    产品型号:12462
    适用范围:高教
    所在地区:
    上架时间:2018年10月15日
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  • 详细说明
    QIAGEN Large-Construct Kit 12462

     

    QIAGEN Large-Construct Kit

    纯化至多50 μg BAC、PAC和P1 DNA或至多200 μg的柯斯质粒DNA和非基因组DNA
     
    高效去除基因组DNA污染
    转染级别纯度的高分子量DNA
    快速简单的操作

    QIAGEN Large-Construct Kit提供重力流和阴离子交换柱,用于纯化大分子量的DNA。独特的ATP-dependent外切酶消化步骤,确保特异性去除基因组DNA。产物DNA的纯度相当于经过两次CsCl密度梯度离心得到的纯度,适用于转染级别的应用。

    高效去除基因组DNA。

    对使用QIAGEN Large-Construct Kit或标准阴离子交换步骤分离的1 μg 105 kb BAC DNA重组载体进行ABI PRISM 7000 (TaqMan) 分析,如图所示。检测使用QIAGEN Large-Construct Kit获得的基因组DNA需要的扩增循环数较多,说明其中的污染基因组DNA含量较低。

    性能

    使用QIAGEN Large-Construct Kit纯化DNA,无基因组DNA的污染(参见Efficient removal of genomic DNA)。基因组DNA的去除确保准确可靠的进行DNA定量,使一些敏感实验可在明确的和可重复的条件下进行。

    原理

    QIAGEN Large-Construct Kit使用经优化的重力流操作,获得的DNA的纯度显著高于其他常规方法获得的DNA的纯度。独特的ATP-dependent外切酶消化步骤,确保特异性去除基因组DNA。
     
    QIAGEN Large-Construct Kit含有的QIAGEN-tips中独特的阴离子交换树脂专为核酸纯化设计。其出色的核酸分离特性可纯化得到高纯度DNA,相当于经过两次氯化铯梯度离心得到的纯度。预装的QIAGEN-tips(参见Anion-exchange tips)运用重力沉降原理,减少了质粒制备过程所需的手工操作时间。整个QIAGEN质粒纯化系统不使用苯酚、氯仿、溴乙锭和氯化铯等有毒物质,最大程度减小了对使用者及环境的危害。

    操作流程

    使用碱裂解法裂解多达500 ml的培养液后(参见QIAGEN Plasmid Kit procedures),使用试剂盒中的ATP-dependent外切酶进行消化,确保特异性去除基因组DNA及缺损的高分子量DNA。之后将样本上样至阴离子交换柱,在适当的低盐浓度和pH值条件下,质粒DNA与树脂特异性结合。用中等盐浓度的缓冲液洗涤,去除RNA、蛋白质、代谢物和其他小分子的杂质。用高盐缓冲液洗脱已去除基因组DNA的纯化质粒DNA。加入异丙醇使DNA浓缩和脱盐,之后离心收集。

    应用

    QIAGEN Large-Construct Kit纯化获得的DNA适用于各种下游应用,包括:
    亚克隆和鸟枪法制备DNA文库 对高分子量DNA直接进行测序 转染