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P53 免疫组化检测试剂盒 H

P53 免疫组化检测试剂盒 H

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P53 免疫组化检测试剂盒 H上海抚生生物科技有限公司产品信息展示:
视网膜母细胞瘤相关蛋白1抗体IgG 大鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA
磷酸化视网膜母细胞瘤相关蛋白1抗体IgG 大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA
磷酸化视网膜母细胞瘤相关蛋白1抗体IgG 大鼠胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)ELISA
磷酸化视网膜母细胞瘤相关蛋白1抗体IgG 大鼠趋化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA
磷酸化视网膜母细胞瘤相关蛋白1抗体IgG 大鼠纤连蛋白(FN)ELISA
过氧化还原酶3抗体IgG 大鼠睫状神经营养因子(CNTF)ELISA
过氧化还原酶6抗体IgG 大鼠骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA
过氧化还原酶1抗体IgG 大鼠骨成型蛋白受体1A(BMPR-1A)ELISA
抗乙肝病毒pre-X蛋白抗体IgG 大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA
抗乙肝病毒pre-X蛋白抗体(C端)IgG 大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA
蛋白质精氨酸甲基转移酶1抗体IgG 大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA
肾上腺髓质素前提N端20肽抗体IgG 大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA
半胱天冬酶-3酶原抗体IgG 大鼠活化素A(ACV-A)ELISA
前纤维蛋白1抗体IgG 大鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA
前纤维蛋白2抗体IgG 大鼠血管紧张素转化酶(ACE)ELISA
内分泌腺衍生血管内皮生长因子抗体IgG 大鼠巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA
T淋巴细胞激活蛋白抗体IgG 大鼠巨噬细胞炎症蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA
兔抗、大、小鼠低分子质量蛋白2抗体IgG 裸鼠环加氧酶2(COX-2)ELISA
低分子质量蛋白7抗体IgG 裸鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA
辣根过氧化物酶标记抗三聚氰胺抗体IgG 裸鼠克拉拉细胞蛋白(CC16) ELISA
早老素蛋白-1抗体IgG 裸鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA
早老素蛋白-1抗体IgG 仓鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELISA
早老素蛋白-1抗体IgG 仓鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)E
P53 免疫组化检测试剂盒 H  Western Blot技术:
一、 原理
与Southern或Northern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝#纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。二、分类
现常用的有底物化学发光ECL和底物DAB呈色,体同水平和实验条件的是用第一种方法,目前发表文章通常是用底物化学发光ECL。只要买现成的试剂盒就行,操作也比较简单,原理如下(二抗用HRP标记):反应底物为过氧化物+鲁米诺,如遇到HRP,即发光,可使胶片曝光,就可洗出条带。
三、主要试剂
1、 丙烯酰胺和N,N’-亚甲双丙烯酰胺,应以温热(以利于溶解双丙稀酰胺)的去离子水配制含有29%(w/v)丙稀酰胺和1%(w/v)N,N’-亚甲双丙烯酰胺储存液丙稀酰胺29g,N,N-亚甲叉双丙稀酰胺1g,加H2O至 100ml。)储于棕色瓶,4℃避光保存。严格核实PH不得超过7.0,因可以发生脱氨基反应是光催化或碱催化的。使用期不得超过两个月,隔几个月须重新配制。如有沉淀,可以过滤。
2、 十二烷基硫#钠SDS溶液:10%(w/v)0.1gSDS,1mlH2O去离子水配制,室温保存。
3、 分离胶缓冲液:1.5mmol/L Tris-HCl (pH8.8):18.15gTris和48ml1mol/L HCl 混合,加水稀释到100ml终体积。过滤后40℃保存。
4、 浓缩胶缓冲液:0.5mmol/L Tris-HCl (pH6.8):6.05gTris溶于40mlH2O中,用约48ml 1mol/L HCl调至pH6.8加水稀释到100ml终体积。过滤后40C保存。这两种缓冲液必须使用Tris碱制备,再用HCL调节PH值,而不用 Tris.CL。
5、 TEMED原溶液N,N,N’N’四甲基乙二胺催化过硫#铵形成自由基而加速两种丙稀酰胺的聚合。PH太低时,聚合反应受到抑制。10%(w/v)过硫#胺溶液。提供两种丙稀酰胺聚合所必须的自由基。去离子水配制数ml,临用前配制.
6、 SDS- PAGE加样缓冲液:pH6.8 0.5mol/L Tris缓冲液8ml,甘油6.4ml,10%SDS 12.8ml,巯基乙醇3.2ml,0.05%溴酚蓝1.6ml,H2O 32ml混匀备用。按1:1或1:2比例与蛋白质样品混合,在沸水终煮3min混匀后再上样,一般为20-25ul,总蛋白量100μg。
7、 Tris-甘氨#电泳缓冲液:30.3gTris,188g甘氨#,10gSDS,用蒸馏水溶解至1000ml,得0.25mol/L Tris-1.92mol/L甘氨#电极缓冲液。临用前稀释10倍。
8、 转移缓冲液:配制1L转移缓冲液,需称取2.9g甘氨#、5.8gTris碱、0.37g SDS,并加入200ml甲醇,加水至总量1L。
9、 丽春红染液储存液:丽春红S 2g 三#乙#30g 磺基水杨# 30g 加水至100ml 用时上述储存液稀释10倍即成丽春红S使用液。使用后应予以废弃。
10、 脱脂奶粉5%(w/v)。